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國內首個臨床質譜前處理專家共識發布！
2024年01月22日 13:19:52
來源：化工儀器網 點擊量：9016
2023年12月，由中國醫療保健國際交流促進會基層檢驗技術標準化分會、中國醫院協會臨床檢驗專業委員會組織起草的《液相色譜‐串聯質譜法臨床樣品前處理專家共識》正式發布。
【化工儀器網 標準發布】2023年12月，由中國醫療保健國際交流促進會基層檢驗技術標準化分會、中國醫院協會臨床檢驗專業委員會組織起草的《液相色譜‐串聯質譜法臨床樣品前處理專家共識》正式發布，旨在為實驗室方法建立提供指導，助力臨床質譜檢測方法的研發規范發展，這也是國內首個臨床質譜前處理專家共識。
液相色譜–串聯質譜法(LC - MS/MS)集色譜技術的高分離能力和質譜技術的高選擇性、高特異性及高靈敏性的優點于一體，成為臨床檢驗領域最具有生命力的新技術之一，但其分析效果往往受待測樣品特性制約。由于質譜儀的抗干擾能力有限,生物樣本多需要進行合適的樣品前處理才能有效提高檢測性能，實現精準檢測。前處理的主要作用是將目標分析物從生物基質中有選擇性地分離出來，減少其他基質組分的干擾。同時，還可將目標分析物濃縮和富集，提高檢測靈敏度。目前，臨床樣本前處理方法不僅種類多，個別方法耗時繁瑣，給實驗室人員在方法選擇和開發及標準化操作等方面帶來了困難。因此，本共識旨在為實驗室方法建立提供指導，助力臨床質譜檢測方法的研發規范發展。
建議1：樣品前處理技術人員應經過色譜質譜原理、分析化學和藥物分析專業知識、儀器使用及維護、檢測項目、標準操作程序(Standard Operating Procedure，SOP)等專項培訓，考核合格方可上崗。
建議2：樣品前處理方法選擇與儀器的靈敏度相關。濃度低或者質譜離子化效率低的化合物，建議采用衍生化的方法提高化合物的離子化效率，或采用靈敏度更高的質譜儀器。
建議3：實驗室應根據待測物的理化性質、生理水平、檢測精密度、靈敏度等要求，選擇合適的前處理方式和檢測儀器，實現可接受的性能要求和臨床預期用途。
建議4：鑒于液質系統對于所使用的常見試劑、流動相化學級別和樣本的凈化程度要求較高，建議實驗室使用HPLC或LC‐MS純度的試劑，并采用凈化程度較高的前處理方法，減少對液質系統的損耗或污染。根據實驗室對檢測通量的要求，選擇經濟高效的前處理設備(管式或板式)。
建議5：待測物濃度高且基質成分簡單的體液樣本(尿液、淚液、腦脊液等)推薦采用稀釋法。
建議6：對于含有豐富可溶性蛋白的血清、血漿和全血樣本，測定小分子化合物時推薦采用蛋白沉淀法。推薦采用酸、金屬鹽、有機溶劑等作為沉淀劑與樣本按一定比例混合，渦旋混勻，離心取上清后上機檢測。
建議7：根據待測物的不同理化性質和極性特征，實驗室可以采用適當的萃取方式對待測物和基質其它成分進行分離，并綜合干擾物分離難度選擇合適的萃取載體，如從常規萃取(干血斑)、液液萃取、固液萃取到固相萃取，樣本的凈化能力遞增。
建議8：對于有磁珠法試劑盒的檢測項目而言，建議在經過實驗室性能驗證合格后采用。搭配全自動樣本前處理系統，將極大地提高樣本前處理的自動化水平。
建議9：在使用超濾法時，應注意超濾的速率。超濾膜的孔徑應該低于結合目標化合物的蛋白質的分子量，孔徑過大則雜質過高，不能充分分離，孔徑過小則有效成分通透率較低，損失較大。超濾過程中，另外，應控制超濾的條件和時間，如生理條件(37℃、pH7.4)和低至中等的離心力。
建議10：PH值和溫度對于結合態激素和游離激素的平衡至關重要，應在合適的pH值和溫度下進行透析操作。建議使用生化成分盡可能與血清/血漿離子環境接近的透析緩沖液。實驗室應控制適當的緩沖液條件(如37℃、pH7.4)。
建議11：免疫親和提取中的親和柱需要平衡至室溫，再進行樣本提取;對于超過親和柱載量的樣本，需要減少上樣體積進行檢測。
建議12：衍生可以提高待測物穩定性和分析靈敏度，但也有耗時耗力的劣勢，實驗室應選擇合適的衍生試劑和條件，提高檢測效率。
建議13：實驗室應注意前處理過程可能產生的揮發性氣體、發熱、噪音等污染，配備良好的通風、散熱或者隔音設備。有條件的實驗室可以設置獨立的前處理區域，與儀器區分離開，降低對其它儀器和人員的干擾。實驗室應對環境中影響檢測結果的微生物污染、灰塵、電磁干擾、濕度、供電、溫度、聲音和振動等進行評估并設定相應要求。
隨著質譜技術在臨床應用的不斷深入和前處理技術的不斷發展,新型的前處理技術尤其是自動化技術將逐漸被開發并應用于臨床。生物樣品的分析有望實現從樣品的采集、處理、分離到分析的完全自動化。本共識通過文獻調研、用戶調查、專家咨詢收集的臨床問題，重點對現有臨床質譜前處理技術的主要原理、選擇依據和臨床應用進行了闡述，將適時修訂，以滿足臨床規范化應用的需求。希望本共識推動解決臨床檢測樣品前處理規范化發展的問題,在保證檢測結果準確可靠的前提下實現臨床檢測更高效、更經濟、更快捷的前處理過程。
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