【參數信息】

英文名稱：Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit

中文名稱：螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒

CAS NO：61970-00-1

分子量：約61kDa

狀態：白色粉末

熱穩定性：高溫下發光波長紅移，酶活性在常溫（20–25°C）穩定

溶解性： 需用高鹽緩沖液（如1 M Tris，pH 7–8）復溶

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產廠商：西安強化生物科技

【簡單概述】

螢火蟲螢光素酶普遍用作一種報告基因來研究基因調控和功能，以及用于藥物篩選。由于哺乳動物細胞或組織缺乏任何內源性的熒光素酶活性和生物發光的天然屬性，螢火蟲熒光素酶是一種非常靈敏的遺傳報告子。

螢火蟲螢光素酶是一種分子量~61kD的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化螢光素（Luciferin）氧化成氧化熒光素，在此氧化過程中釋放出生物螢光。這一熒光可通過化學發光儀或液閃測定儀進行測定。

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit，正是利用螢光素為底物來檢測細胞內螢火蟲螢光素酶活性的試劑盒，操作簡單、快速、靈敏且呈良好的線性關系。

優勢

裂解能力強：能夠裂解絕大部分種類細胞。

信號更強：能夠精準檢測弱啟動子的表達。

靈敏度更高：可檢測低至數百個細胞樣本。

線性范圍廣：線性檢測范圍超過酶濃度的8個數量級。

【作用機制：生物發光反應與基因表達檢測】

熒光素酶催化的生化反應是試劑盒的核心機制，分為以下兩步：

酶促發光反應：

在 Mg2+、ATP、O2 存在下，熒光素酶（分子量61 kDa）催化底物 D-熒光素 氧化脫羧，生成 氧化熒光素，并釋放波長 560 nm 的黃綠色光。

基因表達關聯性：

將目標基因的啟動子、增強子或 3'-UTR 等調控序列克隆至熒光素酶基因上游/下游，構建報告基因質粒。

轉染細胞后，目標基因的轉錄活性直接驅動熒光素酶表達，酶活性強度與基因表達水平正相關。

通過測量發光值，可量化藥物處理、信號通路激活等對基因轉錄的影響。

雙報告系統的協同作用：

為排除轉染效率差異的干擾，試劑盒常整合 海腎熒光素酶（Renilla luciferase） 作為內參：

螢火蟲熒光素酶檢測目標基因活性，海腎熒光素酶（底物為腔腸素）提供基線校正。

加入抑制劑淬滅螢火蟲信號后，再檢測海腎信號，確保結果準確性。

【相關試劑】

DiOC18(3), 34215-57-1

CDCFDA,SE活細胞示蹤探針

Alexa Fluor 405-Streptavidin

Alexa Fluor 647-Streptavidin

Alexa Fluor 680-Streptavidin

2-NBDG葡萄糖攝取熒光探針

D-Luciferin,Sodium Salt

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit

螢火蟲螢光素酶報告基因檢測

Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit

海腎螢光素酶報告基因檢測

Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit

雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒

CAY10731(H2S Probe)硫化氫熒光探針 2119597-33-8

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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。