目前，染發劑在*受到越來越多的消費者的歡迎，但是染發劑中可能含有一些化學成分，其對人體健康將產生威脅。近年來，很多研究報道，這些化學成分可能會穿透過人的皮膚和頭發，甚至留在人體內數年，進而可能引發皮膚破損、癌癥和基因毒性等很多不良反應。因此，對染發劑中這一類化學成分禁止和限制使用就顯得尤為必要。
        迪馬科技應用實驗室建立的染發劑中32種禁限用物質的檢測方法可以作為國家食品藥品監督管理局頒布的方法的補充版。同以往很多方法相比，該方法大大簡化了檢測過程，有效改進了同分異構體或者結構類似物的分離度。應用該方法，在簡單的反相梯度洗脫過程中，32種禁限用化學成分得到了很好的分離分析，整個分析過程簡單且重復性好。在染發劑及其他相關領域，該方法都具有較強的實用性，可以推廣應用于各種檢測工作中，使檢測工作更加簡單、標準、可靠。

圖1.染發劑中32種禁限用化學成分的結構式

1、適用范圍
本方案適用于化妝品染發劑中32 種禁限用染料的檢測。

2、標準溶液的配制
單標儲備液：準確稱取各待測化學成分標準品50 mg (精確至0.1 mg)，置于10 mL容量瓶中，用甲醇-2 g/L亞硫酸氫鈉水溶液(1:1 v/v)的混合溶液溶解并定容，分別制成5 mg/mL的單標儲備液。部分標準品在上述混合溶液中溶解性較差，采取的措施如下：jia苯-2,5-二胺硫酸鹽和2-氯-p-苯二胺硫酸鹽用2 g/L亞硫酸氫鈉水溶液溶解并定容，濃度均為5 mg/mL；甲苯-3,4-二胺和4-硝基-o-苯二胺用甲醇溶解并定容，濃度均為5 mg/mL；2-硝基-p-苯二胺用無水乙醇溶解并定容，濃度為2.5 mg/mL。所有單標儲備液需保存在-20 ℃的冰箱中，保存期限為1個月。

混合標準溶液：將32種待測化學成分分為兩組，分別準確移取單標儲備液適量置容量瓶中，用2 g/L亞硫酸氫鈉水溶液定容至刻度，配制成目標濃度的混合標準溶液，同樣保存在-20 ℃的冰箱中，保存期限為1個月。可根據需要對此混合標準溶液繼續稀釋，配制成系列濃度的混合標準工作溶液，現用現配。

3、色譜條件
色譜柱: Spursil^® C18, 250 x 4.6 mm, 3 μm (Cat.No.: 82020)
儀器: Agilent 1260液相色譜儀配紫外檢測器
流速: 1.0 mL/min
進樣量: 5 μL
柱溫: 35 ℃
檢測器: UV 280 nm
流動相Ⅰ: 40 mM磷酸二氫鉀(pH 2.8) + 10 mM辛烷磺酸鈉緩沖液(A)-乙腈+甲醇(40+60)(B)
梯度設置

流動相Ⅱ: 40 mM磷酸二氫鉀(pH 2.8) + 10 mM辛烷磺酸鈉緩沖液(A)-乙腈(B)

梯度設置

4、檢測結果

圖2. 21種待測化學成分的混合標準溶液色譜圖（流動相I）

表1. 21種待測化學成分的檢測結果

圖3. 11種待測化學成分的混合標準溶液色譜圖（流動相II）

表2. 11種待測化學成分的檢測結果

        如上，32種化學成分被分為兩組，這兩組待測物均在迪馬Spursil^® C18色譜柱上得到了很好的分離（見圖2和圖3），其洗脫順序、保留時間、分離度和不對稱因子如表1和表2所示。幾乎所有待測物的色譜峰與相鄰峰都達到了基線分離，分離度為1.25以上。除了２-甲基間苯二酚、苯甲基吡唑啉酮和2-氨基-3-羥基吡啶（不對稱因子小于1.5）以外，其余待測物的峰形都幾乎完美對稱，不對稱因子為0.85～1.16。

5、結論
        應用迪馬Spursil^® C18色譜柱建立了染發劑中32種禁限用化學成分的檢測方法。同文獻報道和頒布的方法相比，該方法更加簡便，適于實驗室日常檢測使用。應用該方法，全部32種禁限用化學成分可以在迪馬色譜柱上得到快速、有效的分離檢測，故而可以為實驗人員節省大量的時間，并使得檢測工作更加順利，檢測結果更加可靠。

染發劑中32種禁限用化學成分的檢測相關產品信息

• EndeavorsilC18柱

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