總抗與 Payload 分別用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解：

酶解結束后，均加入 10% FA 乙腈終止，離心待上機測試。

色譜柱：Biozen peptide XB-C18（2.1 × 100 mm, 1.7 μm）；P/N: 00D-4774-AN

流動相 A 相：0.1% 甲酸水溶液；

流動相 B 相：0.1% 甲酸乙腈溶液；

流速：0.3 mL/min；

柱溫：40 ℃；

質譜型號：SCIEX Triple Quad™ 6500系統

離子源類型：電噴霧離子源（ESI+）

掃描方式：多反應監測正負離子模式（MRM）

分別在大鼠血漿中添加低、中、高三個濃度 DS-8201 標品，外標法考察 MagBeads 的提取凈化回收情況見下表，回收率均在 75%~90% 間。通過對比空白基質溶液添加酶解標液和空白溶劑添加酶解后標液，評估提取后基質效應得到，基質效應為 96.5%，可以得到血漿樣本通過 MagBeads 提取凈化后基本上沒有明顯的基質效應。

對于測定的總抗體、結合型載荷與 ADC 的生物轉化，一般采用將生物基質中的所有 ADC 大分子免疫捕獲出來，再進行后續酶解處理的方法。本文選擇的使用通用型人源二抗對 ADC 藥物進行提取捕獲。根據 ADC 濃度、基質復雜程度以及其他檢項的需要，還可以選擇抗載荷抗體與鏈霉親和素結合對偶聯抗體進行捕獲，從而更加提高方法的特異性和靈敏度。