解決方案 | GPC在測量殼聚糖分子量及分布上的應用

殼聚糖及其測定

殼聚糖是目前研究多的多糖類天然高分子材料，對于生物體來說，殼聚糖具有優良的生物相容性和降解性。將其植入人體后，可被人體組織中的酶緩慢吸收，是用來制作縫線和創傷覆蓋材料的優秀高分子材料。由于其*的性能，使得殼聚糖在化工、 輕工、 醫藥、 食品及環境保護等領域中的開發應用研究十分活躍。

殼聚糖的學名為β-（1，4）聚-2-氨基-D-葡萄糖，是甲殼素重要的衍生物,是除蛋白質以外含氮量大的有機氮源,也是自然界中僅有的堿性多糖，其相對分子量通常在10萬-30萬，但幾乎不溶于水，其中分子量是影響殼聚糖溶解性的主要因素之一，分子量越低其溶解性就越好。

凝膠色譜法(GPC)是測定殼聚糖相對分子質量及其分布的常用方法，這將有助于推動殼聚糖作為生物醫用材料的選擇和設計。

應用案例——GPC測定殼聚糖

本案例基于Waters1515凝膠色譜儀，搭配Ultrahydrogel色譜柱，對市售殼聚糖的相對分子量及分布進行計算。

1、儀器

                                     ▲Waters1515凝膠色譜儀，配示差檢測器 

2、標準品

聚乙二醇標準品套組

3、實驗條件

01RI流通池溫度

40 °C

02流動相

50 mM 的醋酸+100 mM 硝酸鈉緩沖液

03流速

0.45 mL/min

04色譜柱

Waters Ultrahydrogel 2000柱，7.8 ×300 mm

05柱溫

40 °C 

06樣品稀釋劑

50 mM 的醋酸+100 mM 硝酸鈉緩沖液

07進樣量

50 μL

08數據處理軟件

Empower QS +GPC計算模塊色譜數據軟件

09樣品處理

1 mg/mL的殼聚糖

4、結果與討論

殼聚糖樣品的色譜圖如下：

圖1. 殼聚糖樣品色譜圖

利用Empower QS中GPC選項的功能，采用標樣的保留時間繪制標準曲線，來計算殼聚糖樣品的分子量分布，軟件會自動計算出對應的重均分子量(Mw)、數均分子量(Mn)、多分散性等相關參數。

連續6針進樣的重復性色譜圖如下，通過計算Mw的RSD小于0.2%，表明此方法重復性良好。

Waters GPC優勢

行業先導Waters 從 1963 年起就致力于 GPC 技術的研究和開發，經過 50 多年的發展，使Waters 成長為 GPC 技術的前鋒。
專業 多項*技術加持，保證檢測結果的準確性及重現性。
易上手 簡單、易操作，性能穩定，專為高聚物領域量身打造。

參考文獻

[1] 凝膠滲透色譜法研究殼聚糖生物材料酶降解過程的均勻性

[2] 用GPC研究殼聚糖氧化降解過程中的分子量及其分布_劉羿君

[3] 殼聚糖作為醫用高分子綜述-王霞