高速逆流色譜法的技術(shù)特點(diǎn)

閱讀：2208發(fā)布時(shí)間：2018-5-21

高速逆流色譜法 (High-speed Countercurrent Chromatography，簡(jiǎn)稱HSCCC)，于1982年由美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院Ito博士研制開(kāi)發(fā)的一種新型的、連續(xù)的液液分配色譜技術(shù)，與其它色譜技術(shù)不同的是它不需任何固態(tài)載體，因此能避免固相載體表面與樣品發(fā)生反應(yīng)而導(dǎo)致樣品的污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響。同時(shí)它也具有適用范圍廣、快速、進(jìn)樣量大、費(fèi)用低、回收率高等優(yōu)點(diǎn)。因此，己在生物、醫(yī)藥、食品、材料、化妝品和環(huán)保等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用，尤其是在天然產(chǎn)物活性成分的分離純化領(lǐng)域倍受重視。

1．應(yīng)用范圍廣，適應(yīng)性好

由于溶劑系統(tǒng)的組成及配比可以是無(wú)限多的，因而從理論上講可以適用于任何極性范圍內(nèi)樣品的分離，在分離天然化合物方面具有其獨(dú)到之處。由于聚四氟乙烯管中的固定相為液體不需要固相載體，因而可以消除固-液色譜中由于使用固相載體而帶來(lái)的吸附損失，特別適用于分離極性物質(zhì)。

2．回收率高

不需要固相載體，消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失，理論上樣品的回收率可達(dá)。在實(shí)驗(yàn)中只要調(diào)整好分離條件，一般都有很高的回收率。

3．操作簡(jiǎn)便，容易掌握

儀器操作簡(jiǎn)單，對(duì)樣品的預(yù)處理要求低，一般的粗提物即可進(jìn)行的制備分離或分析。

4．重現(xiàn)性好

如果樣品不具有較強(qiáng)的表面活性作用，酸堿性也不強(qiáng)，即使多次進(jìn)樣，其分離過(guò)程都保持很穩(wěn)定，而且重現(xiàn)性相當(dāng)好。

5．分離效率高，分離量較大

由于其與一般的色譜分離方式不同，能實(shí)現(xiàn)梯度洗脫和反相洗脫，亦能進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣，使其特別適用于制備性分離，產(chǎn)品純度高，制備量大。

6．分配系數(shù)

溶劑系統(tǒng)的選擇是同時(shí)選擇色譜分離過(guò)程的兩相，是對(duì)樣品成功分離的關(guān)鍵所在，而樣品中各組分的分配系數(shù)決定著這種溶劑系統(tǒng)是否合適，因此分配系數(shù)的測(cè)定是選擇溶劑系統(tǒng)的重要環(huán)節(jié)。目前，分配系數(shù)的測(cè)定多采用薄層色譜法、毛細(xì)管電泳法、HPLC法、生物活性分配比率法及分析型HSCCC法。

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