高速逆流色譜儀的技術特點及應用介紹

閱讀：2503發布時間：2022-4-25

高速逆流色譜法 (High-speed Countercurrent Chromatography，簡稱HSCCC)，是一種連續高效的液液分配色譜技術，與其它色譜技術不同的是它不需任何固態載體，因此能避免固相載體表面與樣品發生反應而導致樣品的污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響。同時它也具有適用范圍廣、快速、進樣量大、費用低、回收率高等優點。因此，己在生物、醫藥、食品、材料、化妝品和環保等領域獲得了廣泛的應用，尤其是在天然產物活性成分的分離純化領域受重視。

高速逆流色譜是一種液-液色譜分離技術，它的固定相和流動相都是液體，沒有不可逆吸附，具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優點。由于HSCCC與傳統的分離純化方法相比具有明顯的優點，因此此項技術己被廣泛應用于中藥成分分離、保健食品、生物化學、生物工程、天然產物化學、有機合成、環境分析等領域。它相對于傳統的固—液柱色譜技術，具有適用范圍廣、操作靈活、高效、快速、制備量大、費用低等優點。HSCCC 技術正在發展成為一種備受關注的新型分離純化技術，已經廣泛應用于生物醫藥、天然產物、食品和化妝品等領域，特別在天然產物行業中已被認為是一種有效的新型分離技術；適合于中小分子類物質的分離純化。

高速逆流色譜法的技術特點

1．應用范圍廣，適應性好

由于溶劑系統的組成及配比可以是無限多的，因而從理論上講可以適用于任何極性范圍內樣品的分離，在分離天然化合物方面具有其獨到之處。由于聚四氟乙烯管中的固定相為液體不需要固相載體，因而可以消除固-液色譜中由于使用固相載體而帶來的吸附損失，適用于分離極性物質。

2．操作簡便，容易掌握

儀器操作簡單，對樣品的預處理要求低，一般的粗提物即可進行的制備分離或分析。

3．回收率高

不需要固相載體，消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失，理論上樣品的回收率可達。在實驗中只要調整好分離條件，一般都有很高的回收率。

4．重現性好

如果樣品不具有較強的表面活性作用，酸堿性也不強，即使多次進樣，其分離過程都保持很穩定，而且重現性相當好。

5．分離效率高，分離量較大

由于其與一般的色譜分離方式不同，能實現梯度洗脫和反相洗脫，亦能進行重復進樣，使其特別適用于制備性分離，產品純度高，制備量大。

6．分配系數

溶劑系統的選擇是同時選擇色譜分離過程的兩相，是對樣品成功分離的關鍵所在，而樣品中各組分的分配系數決定著這種溶劑系統是否合適，因此分配系數的測定是選擇溶劑系統的重要環節。分配系數的測定多采用薄層色譜法、毛細管電泳法、HPLC法、生物活性分配比率法及分析型HSCCC法。

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