制備色譜儀的相關介紹

閱讀：2759發布時間：2022-6-30

高速逆流色譜是一種連續高效的液—液分配色譜分離技術，它不用任何固態的支撐物或載體。它利用兩相溶劑體系在高速旋轉的螺旋管內建立起一種**的單向性流體動力學平衡，當其中一相作為固定相，另一相作為流動相，在連續洗脫的過程中能保留大量固定相。

由于不需要固體支撐體，物質的分離依據其在兩相中分配系數的不同而實現，因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失、失活、變性等，不僅使樣品能夠全部回收，回收的樣品更能反映其本來的特性，適合于天然生物活性成分的分離。而且由于被分離物質與液態固定相之間能夠充分接觸，使得樣品的制備量大大提高，是一種理想的制備分離手段。

它相對于傳統的固—液柱色譜技術，具有適用范圍廣、操作靈活、高效、快速、制備量大、費用低等優點。HSCCC 技術正在發展成為一種備受關注的新型分離純化技術，已經廣泛應用于生物醫藥、天然產物、食品和化妝品等領域，在天然產物行業中已被認為是一種有效的分離技術；適合于中小分子類物質的分離純化。

制備色譜儀比較常用的是制備薄層板色譜、制備離心薄層色譜、制備干柱薄層色譜三個類別。

1、制備薄層板色譜

制備板：一般使用200X200mm的薄層色譜板，吸附劑厚度為0.5~1mm，一般不超過2m，平均1mm厚需要的硅膠量為15~20g。為了得到低成本、鋪層均勻的高質量制備薄層板，建議使用上海科哲公司的TD-II型全自動制備薄層鋪板機。

點樣：制備薄層分離的樣品量大，一般采用條帶點樣、不使用圓點點樣；一般1mm厚的硅膠*大約100mg，樣品濃度不宜太稀，應在2~10%為宜。為了得到均勻而規則的點樣結果，建議使用上海科哲公司的SP-3型電動薄層條帶點樣器。同時展開劑的用量比較大，點樣位置要比較高

展開：薄層色譜層析缸要充分飽和，如制備板數量較多，請選用上海科哲公司的制備薄層板架；

顯色：一般使用紫外燈或碘蒸汽等非破壞方式顯色，或在板邊緣進行化學試劑顯色；

回收：將檢測到的樣品連同硅膠一齊刮下，防入砂芯漏斗，使用適當溶劑將組分洗脫，將洗脫溶劑蒸干即可。一般希望洗脫溶劑沸點較低，不與組分發生反應。

制備薄層板色譜優點是使用方便、便宜、節省人力，缺點是分離時間較長。

2、制備離心薄層色譜

與普通制備板有三個不同點：

首先：色譜板是圓的，是徑向色譜，分離能力優于方板；

其次：洗脫液的流動不靠毛細現象，靠離心力，減少了分離時間與脫尾，分離效能很高；

后：洗脫液是連續流動的，可以非常容易的形成梯度，并且不需要刮下吸附層，這樣可以使色譜板可以反復使用；

所以，制備離心薄層色譜的分離效能與分離速度要遠高于制備薄層板色譜，建議采用上海公司科哲公司的KH-CTLC型制備離心薄層色譜儀。

3、制備干柱薄層色譜

可以看作棒狀的薄層色譜，優點是簡單易行，快速經濟、制備量大。缺點是必須使用可透紫外的管材，而且在收集樣品時要割斷管材，使費用略高。上海科哲公司提供專用的薄層色譜柱。本方法與真空系統聯用，構成減壓真空色譜，性能會得到進一步提升。

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