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            研域(上海)化學試劑有限公司
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            研域解析:酶聯免疫吸附法

            時間:2020/1/16閱讀:1824
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            原理:可用于測定抗體,也可用于檢測杭原。其基本原理是采用抗原與抗體的特異反響將待測物與酶連接,然后通過酶與底物發生顏色反響,用于定量測定。酶聯免疫吸附法測定的對象可所以抗體也可所以抗原。3種必要的試劑: 

            ①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑); 

            ②酶符號的抗原或抗體(符號物); 
            ③酶效果的底物(顯色劑)。

            ELISA進程包括:抗原吸附在固相載體上,這個進程稱為包被,加待測抗體, 再加相應酶符號抗體,生成抗原--待測抗體--酶符號抗體的復合物,再與該酶的底物反響生成有色產品。借助分光光度計的光吸收核算抗體的量。

            依據檢測意圖和操作過程不同,有以下三種類型的常用辦法:

            a、間接法  

            此法是測定抗體zui常用的辦法。將已知抗原吸附于固相載體。加人待檢標本(含相應抗體)與之結合。洗刷后,加人酶標抗球蛋白抗體(酶標抗抗體)和底物進行測定。

            b、雙抗體夾心法  

            酶聯免疫吸附法此法常用于測定抗原。將已知抗體吸附于固相載體,加人待檢標本(含相應抗原)與之結合。溫育后洗刷,加人酶標板中。

            c、競爭法  

            此法可用于抗原和半抗原的定量測定,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,將特異性抗體吸附于固相載體。參加待測抗原和一定量的酶標已知抗原,使二者竟爭與固相抗體結合;通過洗刷分離,zui后結合于固相的酶標抗原與待測抗原含量呈負相關。

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