常溫細胞處理方式

細胞（Cells）是由英國科學(xué)家羅伯特·胡克（Robert Hooke，1635～1703）于1665年發(fā)現(xiàn)的。當(dāng)時他用自制的光學(xué)顯微鏡觀察軟木塞的薄切片，放大后發(fā)現(xiàn)一格一格的小空間， [1] 就以英文的cell命名之，而這個英文單字的意義本身就有小房間一格一格的用法，所以并非另創(chuàng)的字匯。

當(dāng)收到了常溫的細胞，正確的處理方式應(yīng)該是怎樣的。

一、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。

    二、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量叢瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)趨置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

    三、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

    四、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài);建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

    五、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%，可正常傳代;若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5m左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。

六、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離 心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5m培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密，度達80%左右時再進行傳代操作。

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