操作大鼠ELISA試劑盒過程中需要注意的事情

1. 大鼠ELISA試劑盒試劑的選擇

通常所使用的ELISA試劑盒或其它試劑，必須注冊批準(zhǔn)、批檢合格、臨床評估質(zhì)量優(yōu)良，并且均在有效期內(nèi)使用。不同批號試劑組分不得混用，過期的試劑一律不得使用，首先提升實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。

2. 大鼠ELISA試劑盒樣品的采集與保存

用于檢測的標(biāo)本應(yīng)保持新鮮，標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免溶血，因紅細(xì)胞破裂可釋放過氧化物酶活性物質(zhì)，干擾結(jié)果，會出現(xiàn)假陽性;標(biāo)本如果受細(xì)菌污染，會因菌體中含有內(nèi)源性過氧化物酶而出現(xiàn)假陽性; 混濁或有沉淀的血清樣品應(yīng)離心，待澄清后方可檢測，避免對結(jié)果造成影響。

用于HIV抗體檢測的血清或血漿樣品應(yīng)存放于-20°℃以下，短期(1周內(nèi))進(jìn)行檢測的樣品可存放于2°℃~8℃。融解時(shí)應(yīng)上下顛倒充分混勻，動作要輕緩，避免產(chǎn)生氣泡。同時(shí)應(yīng)注意避免樣品反復(fù)凍融，否則會造成樣品抗體效價(jià)降低，影響其結(jié)果。

3. 大鼠ELISA試劑盒加樣

加樣前應(yīng)注意將微孔板條從冷藏環(huán)境中取出放置室溫，待試劑平衡后方可使用，未用完者需放入有干燥劑的密封袋中保存。整個(gè)HIV抗體檢測必須符合《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》，嚴(yán)格防止交叉感染。操作時(shí)必須戴手套、穿工作衣，嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離制度。

加樣要用微量移液器(要求準(zhǔn)確性高并定期進(jìn)行校正)，按規(guī)定的量加入孔內(nèi)，避免加在孔壁的邊緣，垂直加樣，不要使吸頭碰到酶標(biāo)板孔上的已包被的抗原，加樣時(shí)盡量慢吸快放，同時(shí)注意不要濺出，避免產(chǎn)生氣泡。

每次加樣都要更換吸頭，做到一樣一吸頭，防止發(fā)生交叉污染，干吸頭預(yù)先在血清中抽吸3次，以便保證加樣量的準(zhǔn)確性。滴加試劑應(yīng)先將滴瓶搖勻后再進(jìn)行滴加，以免產(chǎn)生氣泡。

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