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化妝品中硫柳汞的測定——HPLC法
硫柳汞是一類含汞的有機化合物，由于硫柳汞具有美白功效，一些不法商人將汞類化合物違法添加至化妝品中。我國《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》對化妝品中硫柳汞含量和范圍作了相關(guān)規(guī)定，用量不超過0.007%，用于眼部化妝品中。
目前檢測硫柳汞的文獻方法較少，主要有化學滴定法、分光光度計法、HPLC-UV和HPLC-ICP-MS等方法。目前的檢測方法在耗材成本、干擾排除、測試范圍等方面均存在一定的局限性。液相色譜法選擇性強、靈敏度高、分離度好，是具有一定研究基礎(chǔ)與推廣意義的分析方法。
方法優(yōu)勢：
迪馬科技建立固相萃取-液相色譜法檢測化妝品中硫柳汞，樣品用甲醇溶解后，使用固相萃取柱進行凈化，液相色譜法檢測。
方法定量限是35.0 mg/kg(以汞計)，低于化妝品衛(wèi)生規(guī)范的規(guī)定，回收率達80%以上；
本方法操作簡單，凈化效果好，同時保證結(jié)果的準確性、重現(xiàn)性；
本方案適用于各省市出入境、質(zhì)檢、疾控、食品藥品檢驗所、第三方檢測機構(gòu)、高校和科研院所等。
以下為詳細解決方案，敬請參考！
化妝品中硫柳汞的測定——HPLC法
1、適用范圍
本方案適用于卸妝液、眼霜、睫毛膏、眼影等眼部化妝品中硫柳汞的檢測；本方法定量限是35.0 mg/kg（以汞計）。
2、卸妝水
2.1提取
搖勻樣品，取0.5 mL，加入5 mL甲醇，充分搖勻2 min，待凈化。
2.2 凈化——ProElut LLG 6 mL（Cat#：65916）
a活 化： | 5 mL甲醇、10 mL 10%甲酸甲醇、10 mL甲醇活化； |
b上 樣： | 加入待凈化液，棄去流出液； |
c淋 洗： | 加入5 mL甲醇，棄去流出液； |
d洗 脫： | 加入3 mL 10%甲酸甲醇，收集流出液；用10%甲酸甲醇定容至3 mL，混勻，供HPLC分析。 |
3、眼影、眼霜、睫毛膏、眼部凝膠、眼線液、眼線膏、眉筆
3.1提取
取樣品0.5 g，加入10 mL甲醇，充分振搖1 min（較粘樣品可適當超聲輔助溶解），6000 rpm下離心2 min，收集上清液，取5 mL上清液待凈化。
3.2 凈化——ProElut NH2 200 mg/3 mL（Cat#：63303）
a活 化： | 3 mL甲醇、6 mL 10%甲酸甲醇、6 mL甲醇活化； |
b上 樣： | 加入待凈化液，棄去流出液； |
c淋 洗： | 加入3 mL甲醇，棄去流出液； |
d洗 脫： | 加入3 mL 10%甲酸甲醇，收集流出液；用10%甲酸甲醇定容至3 mL，混勻，供HPLC分析。 |
4、色譜條件
色譜柱：Spursil C18，250 mm × 4.6 mm，5 μm（Cat#：82006）
流 速：1.0 mL/min 進樣量：20 μL 柱 溫：35 ℃
檢測器：PDA 240 nm
流動相：50 mmol/L乙酸銨：甲醇=60：40
5、添加回收結(jié)果
化妝品中硫柳汞HPLC檢測添加回收結(jié)果
樣品 | 添加水平mg/kg (以汞計) | 平均回收率 （%） | RSD(%) (n=6) |
卸妝液 | 35 | 90.73 | 9.83 |
70 | 94.80 | 3.52 | |
140 | 84.08 | 10.38 | |
眼霜 | 35 | 93.67 | 6.84 |
70 | 104.55 | 5.92 | |
140 | 106.91 | 7.39 | |
眼線液 | 35 | 84.09 | 10.30 |
70 | 105.40 | 4.81 | |
140 | 94.06 | 2.50 | |
眼影 | 35 | 84.77 | 13.70 |
70 | 108.25 | 4.18 | |
140 | 97.46 | 1.39 |
硫柳汞標準品(11.67 mg/L，以汞計)液相色譜圖
硫柳汞標準品(23.33 mg/L，以汞計)液相色譜圖
加水平為70 mg/kg卸妝液中硫柳汞檢測的液相色譜圖
卸妝液中硫柳汞檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為70 mg/kg眼霜中硫柳汞檢測的液相色譜圖
眼霜中硫柳汞檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為70 mg/kg眼線液中硫柳汞檢測的液相色譜圖
眼線液中硫柳汞檢測(空白樣品)的液相色譜圖
添加水平為70 mg/kg眼影中硫柳汞檢測的液相色譜圖
眼影中硫柳汞檢測(空白樣品)的液相色譜圖
化妝品中硫柳汞的測定——HPLC法相關(guān)產(chǎn)品信息：
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
樣品前處理 | ||
65916 | ProElut LLG | 350 mg/6 mL 30/pk |
63303 | ProElut NH2 | 200 mg/3 mL 50/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用連接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30039 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
標準品 | ||
50D-273539-5G | 硫柳汞[54-64-8] | 5 g |
色譜柱及保護柱 | ||
82006 | Spursil C18 極性改性反相色譜柱 | 250 x 4.6 mm，5 μm |
6803 | Spursil C18保護柱芯 | 5 μm, 10 x 4.0 mm 2/pk |
6220 | EasyGuard保護柱柱套 | 1/pk |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 | ||
50102 | 甲醇 HPLC級 | 4 L |
50144 | 甲酸 HPLC級 | 50 mL |
50138 | 乙酸銨 HPLC級 | 100 g |
通用色譜產(chǎn)品 | ||
52401B | 瓶架/藍色（現(xiàn)貨） | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色（現(xiàn)貨） | 50孔 |
1034 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊（已經(jīng)組裝） | 100/pk |
H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |
紅色產(chǎn)品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*