一、液相色譜柱選擇方法|液相色譜柱選擇的簡單思路

 

1.確定分離目的確定你的應用是否要求高分離度、短分析時間、高靈敏度、長柱壽命，低的操縱本錢等等。

 

2.評估分析物的化學性質評估分析物的化學性質..諸如化學結構、溶解性、穩(wěn)定性等等。

 

3.選擇合適的色譜柱了解色譜填料的物理和化學性質。

 

二、液相色譜柱選擇方法|液相色譜柱選擇的條件

 

A填料基質

 

1.硅膠基質：純度高本錢低，強度大，化學修飾輕易，但pH值范圍有限。大多硅膠基質填料在pH2-8之間穩(wěn)定，但經過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10。

 

2.聚合物基質：應用pH值范圍寬，溫度穩(wěn)定(高溫可以達到80度以上)，機械強度小。

 

B顆粒外形

 

大多現(xiàn)代HPLC填料都是球形顆粒，但有時是不規(guī)則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩(wěn)定性以及較長的柱壽命在使用高粘度的活動相時;不規(guī)則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價格。

 

C顆粒粒徑

 

粒徑越小柱效越高、分離度越高，但同時會導致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。

 

三、液相色譜柱的保存

 

1.反相色譜柱每天實驗后的保養(yǎng)：

 

使用緩沖液或含鹽的流動相，實驗完成后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘，洗掉色譜柱中的鹽，再用甲醇沖洗30分鐘。注意：不能用純水沖洗柱子，應該在水中加入10%的甲醇，防止將填料沖塌陷。

 

2.長期保存色譜柱：

 

如色譜柱要長時間保存，必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中，正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中，離子交換柱可以儲存于水（含防腐劑或柳硫汞）中，并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度*好是室溫。