色譜柱的安裝：

 

a、拆開柱包裝盒，確認色譜柱的類

 

型、尺寸、出廠日期以及柱內貯存的溶劑。

 

b、擰下柱兩端接頭的密封堵頭放回包裝盒供備用。

 

c、按柱管上標示的流動相流向，將色譜柱的入口端通過連接管與進樣閥出口相連接(如條件允許，建議在柱前使用保護柱)；柱的出口與檢測器連接。連接管是外徑為1.57mm、內徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管。連接管的兩端均有空心螺釘及密封用壓環。在接管時一定要設法降低柱外死體積。連接管通過空心螺釘、壓環后盡量用力插到底，然后順時針擰緊空心螺釘，直到擰不動為止，再用扳手繼續順時針擰1／4-1／2圈，切記不要用力過大。如色譜柱通過流動相加壓后有漏液現象，請用扳手繼續順時針擰1／4圈，直至不漏液為止。

 

色譜柱在使用前，*好進行柱的性能測試，并將結果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是*佳條件)，只有這樣，測得的結果才有可比性。

 

1、樣品的前處理

 

a、*好使用流動相溶解樣品。

 

b、使用予處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產生不可逆吸附的雜質。

 

c、使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質。

 

2、流動相的配制

 

液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點：

 

a、流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。

 

b、流動相具有一定惰性，與樣品不產生化學反應(特殊情況除外)。

 

c、流動相的黏度要盡量小，以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果；同時降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。

 

d、流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器，*好使用對紫外吸收較低的溶劑配制。

 

e、流動相沸點不要太低，否則容易產生氣泡，導致實驗無法進行。

 

f、在流動相配制好后，一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發生作用。