本文建立了食品中乳鐵蛋白的HPLC測定方法。參考GB 5009.299-2024中的色譜條件，采用色譜柱Shim-pack Scepter C4-300分析乳鐵蛋白，結果顯示，乳鐵蛋白峰型對稱，重現(xiàn)性良好，滿足檢測要求。此方法可為食品中乳鐵蛋白的測定提供參考。
島津消耗品方案
針對乳鐵蛋白的檢測，SGLC可提供全套解決方案，包含以下產(chǎn)品：
Shim-pack Scepter C4-300, (5 μm, 4.6×250mm, PN: 227-31183-06)
SHIMSEN 肝素親和柱, ≥3mg(PN: 380-00930-02)
SHIMSEN Vial 低吸附PP樣品瓶及蓋墊，1.5mL(PN: 380-00511 & 380-00503)
SHIMSEN Disc PES聚醚砜材質(zhì)針式濾器, 25 mm, 0.45 µm 100/box (PN:380-00304)
Shimadzu LC-40B X3高效液相色譜儀；
色譜柱：Shim-pack Scepter C4-300（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-31183-06）
純水機：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）
SHIMSEN Disc HPTFE針式過濾器（P/N：380-00341）；
低吸附PP樣品瓶SHIMSEN Vial（P/N：380-00509）；
Nichipet Air移液槍：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；
Nichipet Air 10-100 μL（P/N：00-NAR-100）；
Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；
Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-10000）。
取牛乳鐵蛋白標準品50 mg，用水溶解配置標準儲備液（5.0 mg/mL）。取標準儲備液1 mL，用磷酸鹽緩沖液Ⅰ定容至10 mL，制成標準中間液體（0.5 mg/mL），臨用現(xiàn)配。
準確移取上述牛乳鐵蛋白標準中間溶液，用磷酸鹽緩沖液Ⅰ稀釋定容，配制成濃度分別為1.0 μg/mL、5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、50.0 μg/mL、100.0 μg/mL 和200.0 μg/mL的標準系列工作液，臨用現(xiàn)配。
注：乳鐵蛋白易被玻璃樣品瓶吸附，建議使用低吸附PP樣品瓶；低濃度點（1.0 μg/mL、5.0 μg/mL）需現(xiàn)配現(xiàn)進樣。
微孔濾膜可能會導致目標化合物吸附，樣品不建議過膜。
色譜柱：Shim-pack Scepter C4-300（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-31183-06）
流 速：1.0 mL/min
進樣量：50 μL
柱 溫：30 ℃
檢測器：280 nm
流動相：A：0.1%三氟乙酸溶液
B：乙腈
梯度程序如下：
按照上述色譜條件（1.3）進行采集，色譜圖如下：
注：首次使用Shim-pack Scepter C4-300 色譜柱時，可能出現(xiàn)響應低（低濃度點甚至不出峰）、峰形不對稱的情況，需對色譜柱進行鈍化處理（即使用0.5 mg/mL 的標品進樣100 μL），鈍化后連續(xù)進空白溶劑直至無乳鐵蛋白目標峰后，再進行分析。
本文建立了食品中乳鐵蛋白的HPLC 測定方法。參考GB 5009.299-2024 中的色譜條件，采用色譜柱Shim-pack Scepter C4-300 分析乳鐵蛋白，結果顯示，乳鐵蛋白峰型對稱，重現(xiàn)性良好，滿足檢測要求。此方法可為食品中乳鐵蛋白的測定提供參考。
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