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            研域(上海)化學試劑有限公司

            ELISA試劑盒分類操作過程

            時間:2019-6-4閱讀:1877

            1. ELISA試劑盒白介素類可于白色布景上,直接用肉眼查詢效果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
            2. 加酶標抗體:于各反應孔中,參與新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗刷。
            3. 加底物液顯色:于各反應孔中參與臨時制作的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
            4. 停止反應:于各反應孔中參與2M硫酸0.05ml。
            5. 效果判定:可于白色布景上,直接用肉眼查詢效果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:ELISA試劑盒白介素類檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。1.ELISA試劑盒白介素類用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過液。次日洗刷3次。
            6. 加一定稀釋的待檢樣品(不知道抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗刷。(一同做空白、陰性及陽性孔對照)
            7. 于反應孔中,參與新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗刷,zui后一遍用DDW洗刷。
            8. 于各反應孔中參與臨時制作的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘
            9. 于各反應孔中參與2M硫酸0.05ml
             

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