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原來還可以用這種方法代替動物實驗！？

閱讀：357 發布時間：2024-8-2

重組人體表皮（RhE）可以部分替代動物實驗、甚至可能比動物實驗更能作為人體情況預測參考的系統，因此在刺激性和腐蝕性化學品的危害識別和監管領域（如OECD TG 431試驗）具有重要的價值。制藥和化妝品等領域也始終在嘗試借助人造人體組織開展耐受性、毒理學和刺激性研究，從而盡可能地減少開展動物實驗。

用于監管決策的RhE必須經過驗證滿足一定的質量標準，才能夠可靠地區分化學品的潛在危害性。研究人員用BRAND Insert 2in1嵌套培養小室體系，采用先浸沒培養、后氣液相（ALI）培養的方式構建出了RhE，并對其形態、屏障功能和化學品體外腐蝕進行了檢測。

結果顯示，用BRAND Insert 2in1嵌套培養小室建立的RhE模型在形態學、屏蔽功能檢測和體外腐蝕性測試實驗的檢測結果與其他品牌小室內建立的沒有顯著差異，并且在體外腐蝕性測試實驗結果統計中表現出更小的標準偏差。

形態學檢測

對RhE模型的橫截面進行HE染色，可以看到清晰的組織結構。

圖1. 對在BRAND Insert 2in1嵌套培養小室（左）與某品牌小室（右）中培養的RhE模型進行HE染色，人源性角質形成細胞發育成了具有多層角質的結構。

屏障功能檢測（EC50）

在570nm波長下檢測出給定的時間里暴露于化學品的培養物平均存活率大于50%，顯示RhE模型具有明顯的屏障功能。

圖2. 用MTT法檢測暴露于PBS和Triton X-100的RhE模型活性。

體外腐蝕性測試實驗

陰性對照測試比對結果顯示，在BRAND Insert 2in1嵌套培養小室與某品牌小室中培養的RhE模型存活率相近，并且由BRAND Insert 2in1嵌套培養小室建立的RhE模型存活率結果的數據標準偏差更小。

表1. MTT法檢測暴露于PBS的RhE模型活性

為了測試RhE模型是否可用于鑒別化學物質的潛在腐蝕性，將建立的RhE模型暴露在一組化學物質中3分鐘或60分鐘后，對其進行MTT檢測，并將檢測結果進行歸一化處理。結果顯示，暴露后，RhE模型在非腐蝕性物質，如4-（甲硫基）-苯甲醛中可以保持大于50%的活性，而在預評估為腐蝕性物質的甲酸、乳酸中以及陽性對照組實驗中的活性顯著降低。

圖3. 不同化學物質的腐蝕性比較（NC，陰性對照。PC，陽性對照）

綜上所述，BRAND Insert 2in1嵌套培養小室建立的RhE模型，具有良好的形態，清晰的組織結構，完整的屏障功能，可用于體外化學腐蝕性分析，并能帶來更穩定的檢測數據。

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