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            上海一基實業(yè)有限公司
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            大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書

            時間:2011-9-2閱讀:1109
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            本公司專業(yè)供應Elisa試劑盒,*,*,可免費提供代測服務,咨詢!

             

            本說明書僅供參考,以公司現(xiàn)時提供為準,敬請來電索取。本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷。
             
            大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)定量檢測試劑盒(ELISA
            使用說明書
                                                                  
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒試劑盒名稱】
            大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)定量檢測試劑盒(ELISA
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒試劑盒用途
            定量檢測血清、血漿及相關液體。
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒檢測原理
            本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)單克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物AB,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據(jù)標準品和樣品的OD值,計算樣本中大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)含量
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒試劑盒組成

            1
            酶標包被板
            12×8
            7
            顯色劑A
            6mL
            2
            標準品
            0.3mL×6
            8
            顯色劑B
            6mL
            3
            20倍濃縮洗滌液
            25mL
            9
            終止液
            6mL
            4
            樣本稀釋液
            6mL
            10
            說明書
            1
            5
            特殊稀釋液
            6mL
            11
            封板膜
            2
            6
            酶標試劑
            6mL
            12
            密封袋
            1

            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材
            137恒溫箱
            2、標準規(guī)格酶標儀
            3、精密移液器及一次性吸頭
            4、蒸餾水
            5、一次性試管
            6、吸水紙
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒操作步驟】
            1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。
            2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
            3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。
            4、溫育:37水浴鍋或恒溫箱溫育30min
            5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
            6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。
            7、溫育:37水浴鍋或恒溫箱溫育30min
            8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
            9、顯色:每孔先加入顯色劑A 50μL,再加入顯色劑B 50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37避光顯色15min。
            10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。
            11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
            12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒樣本要求】
            1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3,因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
            2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
            3、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒。
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒注意事項】
            1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
            2酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
            3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
            4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度。
            5、本試劑盒定量范圍為6.25-200ng/L,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果(6.25-200ng/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
            6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。
            7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜
            8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。
            9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
             
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒操作程序總結】
             
            準備試劑,樣品和標準品
             

             
            加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘
             
            洗板4次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘
             
            洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘
             
            加入終止液
             
            15分鐘之內(nèi)讀OD值
             
            計算
             
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒檢測范圍
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒規(guī)格】
            96人份/盒 48人份/盒
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒貯藏】
            2-8,避光防潮保存。
            【大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒有效期】
            6個月

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