氨基酸的測定

 價谷物和其它作物產品以及飼料的營養價值時，需要 測定氨基酸的總量及全氨基酸中各個氨基酸的含量。 測定氨基酸總量的方法與蛋白質測定有密切關 系，許多測定蛋白質全氮含量的方法如凱氏法及各種 比色法均可用于測定氨基酸的總量.比較常用的方法 為布三酮比色法及各種色譜法。應用zui早的紙層析法， 設備操作簡單，但分離效果差，難于定量;薄層層析，層 析速度快，靈敏度比紙層析高。氣相色譜法，分析速度 快、靈敏度高，唯分析前必須將氛基酸轉化為易揮發的 衍生物，才能測定。有一些氨基酸容易熱分解，影響定 量結果。液相色譜（HPLC）法對氨基酸分析是一 種快速而可靠的方法。 帶三明比色法在一定pH值下，游離氨基酸與 水合布三酮反應，生成藍紫色的茍二酮炔一茹二酮胺 （diketohydrindy lidene diketohydrindamine，簡稱DY- DA）。其顏色的深淺與氨基酸含量成正比。據此，可用 分光光度計，在波長570納米下，測定DYDA的吸收 值。用以計算試樣中氨基酸的含量。 氛基酸自動分析儀法見氮基酸分析儀。 液相色譜法通常將氨基酸轉化為具有熒光 的DNS一氨基酸（是熒光試劑DNS一CI二甲基氨基蔡 磺酞氛與氨基酸結合成的衍生物），以熒光檢測器測定 氨基酸。下圖是DNS一氨基酸液相色譜圖，是用 熒光檢測器鑒定的。從圖中可以看出，使用液相色 側眼識似貧斗 氮驀酸的測定（determination。f。mino- acid）對植物樣品中一類含氨基的有機化合物進 行定量分析的過程。測定植物生育期中體內氨基酸的 含量，對于研究根系生理、氮素代謝有重要作用。在評 DNS一氮墓酸液相色譜圖 1.DNS一Cl;2.DNS一酞胺;3.異亮氮酸;4.亮氮酸 5.順氮酸;6，脯氛酸;7.苯丙氛酸，8.蛋氨酸;9.丙氛酸; 10.賴氮酸.11.酪氮酸;12.甘氮酸;13.色氮酸14.谷氮 酸;15.蘇氮酸;16.絲氮酸;17.門冬教酸;18.為l~17 的化合物;19.脫氛酸，20.組氛酸;21.精氮酸 譜法，結合熒光檢測技術可以有效的分離及測定氨基 酸。選擇激發波長為 340納米，發射波長為51。納米。 也有將氨基酸生成有紫外吸收的衍生物，用紫外檢測 器檢測;用得zui普遍的是制成苯基海硫因氨基酸 、r:”氨基酸》。不但便于紫外檢測，而且也是測定多 膚和蛋白質中氮基酸順序的重要技術。