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            技術文章

            恒遠生物|人羊膜細胞(WISH)培養建議

            閱讀:802          發布時間:2023-5-24

            品牌: 恒遠生物

            貨號: HYCC10347

            中文名稱: 人羊膜細胞;WISH

            規格: T25

            形態特性: 上皮細胞樣

            生長特性: 貼壁生長

            特征特性: 最初以為這株細胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋法分析,證實該細胞是HeLa細胞污染的;角蛋白陽性。

            培養條件: DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS 

            傳代方法: 1:2~1:4傳代,每周2~3次。

            凍存條件: 無血清細胞凍存液


            一、細胞培養常見問題解答


            1.培養基為什么一般都是偏紅色?

            因為培養基加了酚紅來顯示顏色,指示pH范圍為6-8,顏色會由黃變為紫紅。這是為了我們能更直觀觀察培養液的變化,如變黃,則代表偏酸,偏堿性了就顯示偏紫色。一般來說,細胞吸收營養后,變黃后就暗示我們要換培養基啦!所以密切觀察很重要哦!


            2.細胞的居住環境

            舒適無菌的環境是細胞健康生活的重要基礎。如下圖為培養細胞的器皿,包括形狀、規格、用途多樣的培養瓶、培養皿及培養板。最終住進37℃,5%CO2的恒溫培養箱。


            3.細胞培養皿和培養瓶區別?

            就細胞培養狀態來說,培養瓶和培養皿沒有太大區別,主要在于安全系數(培養瓶>培養皿)、培養細胞數量(大培養瓶>培養皿)。但是培養瓶成本也會相對較高,因此無特殊要求,一般選擇培養皿即可。


            4.為什么細胞復蘇后,很多難以貼壁?

            忽略培養基的問題,主要考慮細胞凍存時狀態差或者復蘇時動作太慢導致細胞死亡。切記最重要的融化速度要快,可不時搖動冷凍管,使之盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。


            5.細胞凍存時對細胞量有要求嗎?

            細胞復蘇時會有一定的細胞死亡,因此細胞的濃度應足夠高,起始濃度106—107個/ml/管。


            6.細胞污染怎么辦?

            如發現細胞有污染,一般建議丟棄。如果細胞非常寶貴,可試著加入含抗生素的培養基反復清洗,并用抗生素含量高的培養基培養,并經常更換培養基。


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