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            技術文章

            恒遠生物|小鼠T淋巴細胞 CTLL-2 培養攻略

            閱讀:306          發布時間:2025-3-12

             一、細胞基本信息

            品牌名稱:  恒遠生物
            產品貨號:  HYCC20033
            細胞名稱:CTLL-2
            中文名稱:小鼠T淋巴細胞
            種屬來源:小鼠
            組織來源:T細胞
            細胞形態:淋巴母細胞樣
            生長特性:懸浮生長
             
            二、培養條件
            氣相:95%空氣,5%二氧化碳
            溫度:37℃
             
            三、培養基與添加物
            基礎培養基:RPMI-1640
            添加物:10%特級胎牛血清(FBS)、100U/ml(或100IU/ml)IL-2、1%青霉素/鏈霉素(P/S)
            注意,有些培養體系可能略有不同,但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2。
             
            四、細胞培養步驟
             
            1. 細胞復蘇
            從液氮罐或-80℃冰箱中取出凍存管,迅速放入37℃水浴中搖晃解凍。
            將解凍后的細胞懸液移至含5ml培養基的離心管中,1000rpm離心5min。
            棄去上清液,補加5mL培養基后吹勻,接種于T25培養瓶中(或6cm皿中),培養過夜。
            第二天換液并檢查細胞密度。
             
            2. 細胞傳代
            當細胞密度達到80%-90%時,進行傳代培養。
            離心收集細胞(1000rpm,5-8min),棄去上清液。
            補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6mL培養基的T25培養瓶中或6cm培養皿中。
            對于較難培養的細胞或新手,可采用豎瓶培養法,逐步補加培養基,待細胞密度升高后再進行傳代。
             
            3. 細胞凍存
            選擇生長狀態良好的細胞進行凍存。
            離心收集細胞(1000rpm,5-8min),去除上清液。
            按凍存數量加入無血清細胞凍存液,輕輕混勻后,分裝入凍存管中(每管約1mL細胞懸液)。
            將凍存管放入-80℃冰箱中過夜,然后轉入液氮罐中儲存。
             
            五、培養注意事項
            細胞接收與檢查:收到細胞后,首先檢查細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有異常,請及時與我司(恒遠生物)聯系。
            無菌操作:在細胞培養過程中,應嚴格遵守無菌操作規程,避免細胞污染。
            細胞密度監控:定期觀察細胞生長情況,及時傳代以避免細胞密度過高導致死亡。
            培養基更換:根據細胞生長情況和培養基顏色變化,適時更換新鮮培養基。
             
            六、售后服務與細胞保存
            若細胞在運輸或培養過程中出現問題,應及時與我司聯系并提供相關證據(如細胞照片、操作記錄等),以便進行售后處理。細胞應儲存在液氮罐中,避免反復凍融以確保細胞活性。
             
            上海恒遠生物科技有限公司擁有自己的實驗室,備有專業的技術研發團隊,長期致力于各種生物試劑,細胞,血清,ELISA試劑盒的研發與銷售,實驗提供免費代測服務,并提供技術服務,如果您有實驗上的問題歡迎前來咨詢,為您提供專業的一對一技術指導。 


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