在ELISA試劑盒實驗中科研新手總會遇到各種不同棘手的問題，比如空白值過高怎么辦？樣本要如何采集？血清能否反復凍融？等等，今天上海恒遠要為您講解的是在實驗中樣品或標準品“溢值”是什么原因造成的。

造成樣品或標準品 “溢值” 主要有以下幾點原因：
1）樣品/標準品不正確稀釋
要嚴格按照說明書來稀釋樣品和標準品。
2）偶合試劑不正確稀釋
要嚴格按照說明書來稀釋偶合試劑，濃度過高會造成OD的 “溢值” HRP偶合試劑的不正確稀釋
3）所用稀釋液不對
只能使用相應試劑盒內的稀釋液稀釋樣品和標準品。
4）檢測波長不正確
要保證分光光度劑的檢測波長是正確的。
5）TMB底物的顯色時間過長
請監控顯色時間。說明書中所示的顯色時間可能因為溫度和其它檢測條件的不同而稍有變化。
6）樣品不適合此檢測
在說明書中會列出每種產品的適用標本范圍，超出范圍的標本可能不適于此試劑盒或者檢測條件需要摸索（如調節稀釋度等）
7）樣品/標準品污染
樣品或標準品的污染可能會導致檢測結果“溢值”。
8）孵育時間/溫度不正確
要嚴格按照說明書來確定孵育時間和溫度。
9）在孵育時為蓋上酶聯板覆蓋物
在孵育時需蓋上酶聯板覆蓋物，以防止液體蒸發或孵育期間的污染。每個試劑盒內均有足夠數量的酶聯板覆蓋物

如果您的實驗也同樣遇到樣品或標準品“溢值”，那么就需要仔細檢查是否是您試劑的問題或者是操作方法不當的問題。只有質量良好的試劑和正確的操作才是的實驗搭檔。

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