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            上海起發實驗試劑有限公司

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            CompTech EA 說明書

            時間:2018/7/4閱讀:403
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              上海起發實驗試劑有限公司
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            上海起發為complementtech一級經銷商,Complement Technology,Inc.于2005年成立.CompTech于2005年收購Advanced Research TechnologiesComplement Technology繼續為世界各地的科學家提供高質量的試劑,并在我們的清單中增加了許多新試劑。我們盡力為您的應用提供試劑和使用我們補充試劑的建議。 

            CompTech EA 說明書

            名稱:   EA(抗體致敏綿羊紅細胞) 

                 EA (antibody-sensitized sheep erythrocytes)                 

            目錄號:   B200 和B201 和B202           

            可用尺寸: 5 mL , 10 mL和20 mL                

            濃度:          5×10 8個細胞/ mL

            吸光度:              412nm處 = 0.87以1/50稀釋在去離子水中

            形式:                         液體 - 不要凍結

            活性:                     補體CH50檢測功能齊全

            緩沖區:                       GVB ++ (CompTech#B100和B102)

            防腐劑:             GVB ++含有0.025%sodium azide作為殺菌劑

            儲存:                     + 4 o C 避免冷凍。冷凍裂解細胞。    

            資源:                       正常 來自美國農業部注冊設施的羊血。

            產地:                       制造于美國。

             

            一般描述

                        涂有兔抗羊紅細胞抗血清(溶血素)的綿羊紅細胞傳統上用于測定血清樣品中補體經典途徑的活性。  這些測定產生血清的CH50滴度(Morgan,BP(2000); Dodds,AW和Sim,RB(1997))。 

                        在CH50測定(GVB ++)中使用的傳統緩沖液中以測定準備濃度提供EA 。  他們每周一早上準備新鮮,需要在 周五之前訂購,以便在下周接收。  它們在周一下午由隔夜快遞運送到周二(或大多數貨運的周三)。它們通常可在制備后使用2周。他們被運往冷,但并不在室溫下長時間傷害(請注意,循環60-90天,37 Ø ç 體內)。它們應該一次每次使用前(在500 3分鐘,4?1000×g下進行洗滌ö C)和再懸浮       在GVB ++中的原始濃度 以減少背景。  該程序也可用于濃縮細胞。  這可以通過減少用于重懸細胞的體積來實現。

             

            物理特征

                        由于以下原因,EA由IgM抗體制成。  IgM在激活經典途徑方面比IgG高約100倍,因為C1q必須與抗體上的至少兩個Fc結構域結合以進行激活。  因此,在敏感的測定中,已經估計每個EA少至10個IgM可以引起裂解,而IgG裂解每個EA需要大約1000個IgG(Ross,GD(1986))。  這主要是因為在IgM中,在每個分子上的固定位置上存在五個緊密間隔的Fc結構域。  因為表面上IgG分子的間隔更隨機,所以在細胞表面上的正確位置發現2至5個IgG分子以結合并激活C1的可能性較小。

             

            測定

                        盡管CH50滴度被廣泛使用并且作為補體活性的主要臨床試驗,但CH50測定程序尚未*標準化。  在研究實驗室中,有與實驗室一樣多的程序,但所有程序基本相似并且給出有用的結果。  可根據要求從CompTech獲得詳細的逐步典型CH50滴定方法。  簡而言之,稀釋含有補體的血清樣品,使得測定中的終稀釋度為1/100至1/500。  對照包括兩個沒有0%裂解背景補體的試管和兩個試管,其中用水代替緩沖液進行100%裂解對照。  在濕冰上應設置分析管。  用GVB +使體積達到1.3mL或水),將管混合并加入0.2mL 5×10 8EA / mL的細胞并混合。  的反應,應溫育在37 60分鐘 ö ℃水浴含有大約10周分鐘的間隔再混合。  1小時后,將剩余的細胞離心(500-1000×g,3分鐘),并在1cm比色皿中在541nm處測定上清液的吸光度。  有多種數學方法可用于繪制結果圖。通過在對數 - 對數圖上繪制x軸上的每個測定中使用的微升血清和y軸上的y /( 1-y),可以獲得幾乎的直線。  術語“y”是指裂解的細胞的比例,在0%裂解時為0,在30%裂解時為0.3,在50%裂解時為0.5,等等。  補體樣品的CH50值從該線在y軸上穿過1.0(50%裂解)獲得,并計算如下:CH50 = 1000除以血清的體積(以μL計),得到50%裂解。  例如,如果用5.6μL血清達到50%裂解,則CH 50 = 179單位/ mL。  應該注意的是,可以在應該是相同的樣品上獲得不同的CH 50值。  這是  CH50測定中涉及的大量變量的結果,包括在春季收獲的綿羊紅細胞比在秋季抽取的血液中的細胞更容易溶解,沒有兩個溶血素抗體很多是相同的,因為它們是由兔子等產生的抗血清制成的。

                       

            應用

                        EA可用于確定血清的CH50溶血滴度,即CH50(參見上文的測定)。  它們可用于使用耗盡的血清滴定單個補體成分的功能活性。  它們也可用于制備攜帶活化的補體中間體的細胞(Morgan,BP(2000); Dodds,AW和Sim,RB(1997))。  將EA與C1溫育以制備(EAC1)或C1和C4(EAC14)。  可以將EAC14細胞與C2一起溫育以制備攜帶經典途徑C3轉化酶的EAC142細胞,并且可以將EAC142與C3一起溫育以制備攜帶C5轉化酶的EAC1423細胞。  每種中間體可用于測定流體相組分的功能補體活性。  例如,EAC142細胞的裂解對低C3濃度極其敏感,并且即使在諸如血清的復雜混合物中,這也可用于滴定C3補體活性。

             

            規    

                        綿羊紅細胞(Es)用于人補體測定,部分是為了方便,但也因為它們缺乏人補體的膜結合調節劑。  對于人補體,在Es上不存在顯著水平的功能性DAF,CD59或CR1。  因此,Es對于它們缺乏膜調節活性是有用的。

             

            參考

            摩根,BP編輯。(2000)補充方法和協議。  Humana新聞。

             

            Dodds,AW和Sim,RB編輯(1997年)。補充實用方法(ISBN 019963539)牛津 大學 按, 牛津。

             

            Ross,GD(1986)補體系統的免疫生物學。(ISBN 0-12-5976402)奧蘭多學術出版社。

             

             

            僅供研究使用。

            不適合人類或藥物使用。

             

             

            complementtech產品目錄:

             

            貨號

            品名

            規格 

            目錄價

            品牌

            A098

            C1

            200µg

            3400

            complementtech

            A099

            C1q

            1000µg

            3162

            complementtech

            A100

            C1q (40% Glycerol)

            1000µg

            3162

            complementtech

            A102

            C1r Enzyme

            250µg

            3417

            complementtech

            A103

            C1s Proenzyme

            250µg

            3366

            complementtech

            A104

            C1s Enzyme

            250µg

            3281

            complementtech

            A140

            C1 Esterase Inhibitor

            1000µg

            3468

            complementtech

            A112

            C2

            50µg

            3298

            complementtech

            A113

            C3

            250µg

            2482

            complementtech

            A113c

            C3 (concentrated)

            1000µg

            7327

            complementtech

            A118

            C3a

            50µg

            3162

            complementtech

            A119

            C3a desArg

            50µg

            3043

            complementtech

            A114

            C3b

            250µg

            3094

            complementtech

            A115

            iC3b

            250µg

            3417

            complementtech

            A116

            C3c

            250µg

            3706

            complementtech

            A117

            C3d

            100µg

            3825

            complementtech

            A105

            C4

            250µg

            3468

            complementtech

            A105c

            C4 (concentrated)

            1000µg

            8245

            complementtech

            A106

            C4a

            50µg

            4114

            complementtech

            A107

            C4a desArg

            50µg

            4114

            complementtech

            A108

            C4b

            250µg

            2992

            complementtech

            A109

            C4b Binding Protein

            250µg

            4131

            complementtech

            A120

            C5

            250µg

            3570

            complementtech

            A144

            C

            30µg

            6188

            complementtech

            A144(300)

            C

            300µg

            詢價

            complementtech

            A145

            C desArg

            50µg

            4301

            complementtech

            A122

            C5b,6

            50µg

            3468

            complementtech

            A123

            C6

            250µg

            3366

            complementtech

            A124

            C7

            250µg

            3366

            complementtech

            A125

            C8

            250µg

            3536

            complementtech

            A126

            C9

            250µg

            3366

            complementtech

            A127

            SC5b-9 Complex

            100µg

            2992

            complementtech

            A135

            Factor B

            250µg

            3213

            complementtech

            A136

            Factor D

            25µg

            3417

            complementtech

            A137

            Factor H

            250µg

            2958

            complementtech

            A137c

            Factor H (conc.)

            10000µg

            詢價

            complementtech

            A138

            Factor I

            100µg

            3366

            complementtech

            A139

            Factor P

            100µg

            3468

            complementtech

            A150

            Cobra Venom Factor  (USA ONLY)

            1000µg

            3298

            complementtech

            A154

            Factor Ba

            100µg

            3298

            complementtech

            A155

            Factor Bb

            250µg

            6188

            complementtech

            A118

            C3a

            50µg

            3162

            complementtech

            A119

            C3a desArg

            50µg

            3043

            complementtech

            A106

            C4a

            50µg

            4114

            complementtech

            A107

            C4a desArg

            50µg

            4114

            complementtech

            A144

            C

            30µg

            6188

            complementtech

            A144(300)

            C

            300µg

            詢價

            complementtech

            A145

            C desArg

            50µg

            4301

            complementtech

            A300

            C1q-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A312

            C2-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A314

            C3-Dpl

            1ml

            2482

            complementtech

            A305

            C4-Deficient Guinea Pig

            1ml

            2448

            complementtech

            A308

            C4-Dpl           

            1ml

            2482

            complementtech

            A320

            C5-Dpl

            1ml

            2125

            complementtech

            A323

            C6-Dpl

            1ml

            2040

            complementtech

            A324

            C7-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A325

            C8-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A326

            C9-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A335

            Factor B-Dpl

            1ml

            2074

            complementtech

            A336

            Factor D-Dpl   

            1ml

            2074

            complementtech

            A337

            Factor H-Dpl

            1ml

            2686

            complementtech

            A338

            Factor I-Dpl    

            1ml

            2482

            complementtech

            A339

            Factor P-Dpl

            1ml

            2482

            complementtech

            A340

            C3/C4 Inactivated Serum

            1ml

            2074

            complementtech

            A399

            C1q/Factor D-Dpl  

            1ml

            2856

            complementtech

            A200

            Goat Anti-Human C1q     

            1ml

            1054

            complementtech

            A212

            Goat Anti-Human C2

            1ml

            2329

            complementtech

            A213

            Goat Anti-Human C3

            1ml

            1054

            complementtech

            A218

            Rabbit Anti-Human C3a

            1ml

            2550

            complementtech

            A205

            Goat Anti-Human C4

            1ml

            1054

            complementtech

            A206

            Rabbit Anti-Human C4a

            1ml

            2550

            complementtech

            A220

            Goat Anti-Human C5

            1ml

            1275

            complementtech

            A221

            Rabbit Anti-Human rC

            1ml

            2550

            complementtech

            A223

            Goat Anti-Human C6

            1ml

            1275

            complementtech

            A224

            Goat Anti-Human C7

            1ml

            1275

            complementtech

            A225

            Goat Anti-Human C8

            1ml

            1275

            complementtech

            A226

            Goat Anti-Human C9

            1ml

            1275

            complementtech

            A227

            Rabbit Anti-Human SC5b-9 Neo (lgG)

            0.2ml

            2584

            complementtech

            A235

            Goat Anti-Human Factor B

            1ml

            1275

            complementtech

            A236

            Goat Anti-Human Factor D

            1ml

            2499

            complementtech

            A237

            Goat Anti-Human Factor H

            1ml

            1275

            complementtech

            A238

            Goat Anti-Human Factor I

            1ml

            1309

            complementtech

            A239

            Goat Anti-Human Factor P

            1ml

            1462

            complementtech

            A240

            Goat Anti-Human C1-INH        

            1ml

            1173

            complementtech

            A260

            Rabbit Anti-Human Vitronectin

            1ml

            1445

            complementtech

            NHS

            Human Serum

            1ml

            578

            complementtech

            GPS

            Guinea Pig Serum

            1ml

            714

            complementtech

            NRS

            Rat Serum

            1ml

            901

            complementtech

            NMS

            Mouse Serum   

            1ml

            1309

            complementtech

            B102

            GVB++ (with Ca and Mg)

            250ml

            1224

            complementtech

            B100

            GVB++ (with Ca and Mg)

            1 Liter

            3264

            complementtech

            B103

            GVB° (without Ca and Mg)

            250ml

            1224

            complementtech

            B101

            GVB° (without Ca and Mg)

            1 Liter

            3264

            complementtech

            B104

            GVBE (with EDTA)

            250ml

            1224

            complementtech

            B105

            GVBE (with EDTA)

            1 Liter

            3264

            complementtech

            B110

            SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

            250ml

            1870

            complementtech

            B111

            SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

            1 Liter

            5066

            complementtech

            B112

            VBS++ (with Ca and Mg)

            250ml

            1224

            complementtech

            B113

            VBS++ (with Ca and Mg)

            1 Liter

            3264

            complementtech

            B200

            EA (Ab-sensitized sheep E)

            5ml @ 5x108/ml

            3043

            complementtech

            B201

            EA (Ab-sensitized sheep E)

            10ml @ 5x108/ml

            4556

            complementtech

            B202

            EA (Ab-sensitized sheep E)

            20ml @ 5x108/ml

            6324

            complementtech

            B210

            Es (sheep E)

            20ml @ 5x108/ml

            2652

            complementtech

            B300

            Er (rabbit E)

            5ml @ 5x108/ml

            1649

            complementtech

            B301

            Er (rabbit E)

            10ml @ 5x108/ml

            2652

            complementtech

            B302

            Er (rabbit E)

            20ml @ 5x108/ml

            3893

            complementtech

            B400

            Zymosan (preactivated)

            10ml @ 1x109/ml

            2261

            complementtech

            B106

            MgEGTA

            10ml @ 0.1M

            1139

            complementtech

            B250

            MCAR

            1.0 ml

            2482

            complementtech

            Hemolysin

            Hemolysin  NEW

            2.0 ml

            2040

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