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            上海起發實驗試劑有限公司

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            abraxis 520011說明書

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            abraxis 520011說明書

            Microcystins/Nodularins (ADDA) (EPA ETV) (EPA Method 546), ELISA, 96-test

            微囊藻毒素/結核

            菌素(ADDA)(EPA ETV)(EPA方法546),ELISA,96試驗

            微咸水或海水中的微囊藻毒素樣品制備

             

            1. 預期用途

            用于制備用于 Abraxis 微囊藻毒素-ADDA ELISA 分析的微咸水或海水樣品。

             

            2. 靈敏度

            在微咸水或海水中為 0.263 ppb

             

            3. 材料和試劑提供一次性 5¾”玻璃巴斯德吸管一次性 9”玻璃巴斯德吸管玻璃棉

            巴斯德吸管燈泡

            微囊藻毒素-ADDA 海水樣品處理液微囊藻毒素-ADDA 海水樣品凈化樹脂

             

            4. 所需的其他材料(未提供)

            12 x 75 mm 試管

            20 mL 玻璃小瓶,帶有聚四氟乙烯內襯蓋,去離子水或蒸餾水

            帶特氟龍內襯蓋的 4 mL 玻璃小瓶 Scoopula

            帶一次性塑料槍頭的微量移液器渦旋混合器

            Abraxis 微囊藻毒素-ADDA ELISA 試劑盒

             

            5. 注釋和注意事項

            本程序預期用于微咸水或海水樣品。其他基質在用于本程序前應進行*驗證。

             

            6. 色譜柱制備程序

            6.1 將少量玻璃棉放入 5¾”玻璃巴斯德吸管頂部。使用 9" 玻璃巴斯德移液器,將玻璃棉推入 5¾" 移液器底部,形成色譜柱底部。玻璃棉的深度應約為 5 mm。將色譜柱置于 12 x 75 mm 試管中。

            6.2 每個色譜柱將需要約 1.5 g 海水樣品清除樹脂。計算微囊藻毒素-ADDA 海水樣品凈化樹脂的適量并加至 20 mL 玻璃瓶中。

            6.3 以約 2:1 的比例向微囊藻毒素-ADDA 海水樣品清除樹脂中加入蒸餾水或去離子水(例如,每 5 g 樹脂中加入 10 mL 去離子水或蒸餾水)。搖動或投票。

            6.4 使用 9" 巴斯德吸管將樹脂水溶液移取至色譜柱中。將移液器吸頭保持在柱床表面,避免在柱床中形成氣泡。在距離移液器頂部約 2 cm 處,將色譜柱填充至壓痕處。這將產生一個約 8 cm 的色譜柱。

            6.5 使去離子水或蒸餾水從色譜柱中排出。  在管中水面以上至少 1 cm 處提起色譜柱。將移液器燈泡靠在色譜柱頂部(不要將燈泡連接到色譜柱上),將剩余的水推出色譜柱。避免

            使色譜柱的頭端與管中的水接觸,以防止水吸入回色譜柱中。

            6.6 將色譜柱置于適當標記的 4 mL 玻璃瓶中。

             

            7. 樣品清理

            7.1 向潔凈、適當標記的 4 mL 玻璃瓶中加入 1 mL 微咸水或海水樣品。加入 50µL 微囊藻毒素-ADDA 海水樣品處理溶液。渦旋。

            7.2 向色譜柱頂部加入 375 μL 經處理的微咸水或海水樣品。使樣品流過色譜柱并收集在小瓶中。

            7.3 向色譜柱中再加入一份 375 μL 經處理樣本。流過色譜柱。

            7.4 在小瓶中樣品表面上方至少 1 cm 處提起色譜柱。將移液器燈泡靠在色譜柱頂部(不要將燈泡連接到色譜柱上),將剩余樣品推出色譜柱。避免色譜柱與小瓶中的樣品接觸,以防止樣品被抽吸回色譜柱中。

            7.5 將色譜柱放回小瓶中。向色譜柱頂部加入 500 μL 蒸餾水或去離子水。使沖洗液流過色譜柱,并與樣品一起收集。

            7.6 將色譜柱頂端抬高至樣品表面上方至少 1 cm 處/小瓶中沖洗液中。將移液器燈泡靠在色譜柱頂部(不要將燈泡連接到色譜柱上),將剩余的沖洗液推出色譜柱。避免色譜柱與小瓶中的樣品接觸,以防止樣品被抽吸回色譜柱中。

            7.7 取出色譜柱并丟棄(色譜柱僅供一次性使用)。蓋上小瓶并渦旋。然后可以使用 Abraxis 微囊藻毒素-ADDA ELISA 試劑盒分析樣品。

             

            8. 結果評價

            將 ELISA 結果乘以因子 1.75,測定樣品中微囊藻毒素的濃度。濃度低于標準品 1 (0.15 ppb) 的樣品應報告為含有 < 0.263 ppb 的微囊藻毒素。濃度高于標準品 5 (5.0 ppb) 的樣品可報告為含有

            > 8.75 ppb 微囊藻毒素或進一步稀釋并重新分析以獲得準確的定量結果。

             

            9. 性能數據

            恢復

            用如上所述制備的微囊藻毒素-LR、微囊藻毒素-LA 或微囊藻毒素-RR 加標含不同濃度海水的樣品,然后使用微囊藻毒素-ADDA 試驗進行分析。微囊藻毒素-LR 的平均回收率為 91.7%。Microcystin-LA 的平均回收率為 92.1%。微囊藻毒素-RR 的平均回收率為 98.9%。

             

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