Elastase - Manual

歷史

Eijkman被認為是第一個研究彈性蛋白酶作為細菌產(chǎn)物的人（Eijkman 1904）。然而，直到1949年Baló和Banga發(fā)表，它才被證明與胰腺的其他蛋白水解成分（如胰蛋白酶和糜蛋白酶）不同。

1968年，肖頓和哈特利是第一個獲得結(jié)晶豬彈性蛋白酶的人。在1960年代末和1970年代初，研究了彈性蛋白酶在肺氣腫，動脈粥樣硬化和急性出血性胰腺炎中的參與（Janoff和Sherer 1968，Janoff和Basch 1971，Talamo等人1971，Kaplan等人1973年和Bieth等人1974）。1974年，Ardelt發(fā)現(xiàn)了第二種彈性分解蛋白酶，將其命名為胰腺“彈性蛋白酶II"和原始的“彈性蛋白酶I"。

在20世紀80年代，研究了彈性蛋白酶的催化性質(zhì)（Ascenzi等人，1983年），并鑒定了抑制劑（Largman等人，1980年，Lestienne等人，1981年，凱特納和申維1984年，Poncz等人1984年，帝國和阿貝爾斯1986年）。1990年代對彈性蛋白酶I和II遺傳信息進行了研究（Ornitz等人，1985年，史蒂文森等人1986年，斯威夫特等人1984年，塔尼等人1987年和蓋斯汀等人1997年）。

彈性蛋白酶最近已用于研究細胞外基質(zhì)分解中的機械力和酶活性（Jesudason等人，2010）。它還研究了它在人工器官發(fā)育中的應(yīng)用（Tedder等人，2010），并被用作研究絲氨酸蛋白酶催化活性的模型（Tamada等人，2009）。

概述

國際單位： 3.4.21.36

豬胰彈性蛋白酶的分子量為25.9 kDa，pH值為8.5。雖然彈性蛋白酶將水解各種蛋白質(zhì)底物，但它在蛋白酶中的特別之處在于其水解天然彈性蛋白的能力，彈性蛋白酶是一種不受胰蛋白酶，糜蛋白酶或胃蛋白酶攻擊的底物。大豆胰蛋白酶抑制劑和激肽釋放酶抑制劑抑制蛋白水解物，但不抑制彈性水解活性。彈性蛋白酶是使用改編自范斯坦等人生物化學(xué)的方法測定的。生物物理學(xué)。Res. Comm.， 50， 1020 （1973） 和使用 Bieth 等人的更可溶性底物， 生物化學(xué)醫(yī)學(xué)， 11， 350 （1974）.

穩(wěn)定性/儲存性：彈性蛋白酶在pH≤3.5時不穩(wěn)定。當(dāng)作為干粉儲存時，酶在2-8°C下穩(wěn)定6-12個月。 彈性蛋白酶產(chǎn)品代碼：ES和ESL在中性pH和濃度大于0.25%時溶解度較差。在稀釋到反應(yīng)混合物或介質(zhì)中之前，在KCl或堿性緩沖液中制備初級溶液是有幫助的，以補償離子強度或pH值的變化。在pH 4.0-10.4下穩(wěn)定。

技術(shù)說明：1個SucAla3NA單位大約相當(dāng)于6個彈性蛋白消化單位。水性液體懸浮液應(yīng)無菌處理，以避免細菌污染。由于水懸浮液（代碼：ES）的粘性，應(yīng)沖洗小瓶以回收內(nèi)容物。

特異性

豬彈性蛋白酶I對Ala-Ala和Ala-Gly鍵具有特異性，而彈性蛋白酶II對P1位置的中到大型疏水性氨基酸的底物具有廣泛的特異性（Gertler等人，1977年，Del Mar等人，1980年和Gestin等人，1997年）。豬彈性蛋白酶是有效的彈性蛋白酶，其速率比人類白細胞彈性蛋白酶高20倍（Bieth 1978，Bieth 1986和Largman 1983）。

水解分幾個步驟發(fā)生。彈性蛋白酶與其底物之間形成吸附復(fù)合物，隨后形成親核攻擊（S214）以形成酰基輔酶中間體，并釋放出第一產(chǎn)物（底物的C端）。中間體在脫酰化步驟中水解，再生活性酶并釋放第二種產(chǎn)物（Bieth 1986）。

組成

催化三元組由三個氫鍵氨基酸殘基（H71，D119和S214）形成。多肽鏈由兩個反平行的β-桶結(jié)構(gòu)域組成，它們形成含有催化三元組的裂縫和一小部分α-螺旋（Bieth 2004）。

分子特性

豬胰彈性蛋白酶由240個氨基酸的單肽鏈組成，并含有4個二硫橋（Sawyer等人，1973）。它與來自其他物種的胰腺彈性蛋白酶具有高度的序列同一性，例如與它共享86%身份的大鼠（MacDonald等人，1982）。彈性蛋白酶I和II基因共享序列相似性，特別是在5'近端側(cè)翼區(qū)域，其中包括TATA盒和推定的組織特異性增強子序列（Ornitz等人1985年，史蒂文森等人1986年，Swift等人1984年，塔尼等人1987年和Gestin等人1997年）。

應(yīng)用

組織解離：由于彈性蛋白在結(jié)締組織的彈性纖維中含量高，因此彈性蛋白酶經(jīng)常用于解離含有廣泛細胞間纖維網(wǎng)絡(luò)的組織。為此，它通常與其他酶一起使用，例如膠原酶，胰蛋白酶和糜蛋白酶。

膜蛋白增溶

蛋白質(zhì)序列研究

產(chǎn)品詳情

名稱    Elastase - Manual

編號    LS002292

品牌    Worthington