一、基本原理

 

吸收光譜：分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發生了電子能級躍遷而產生的吸收光譜。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其特別的、固定的吸收光譜曲線。

 

定性與定量分析：根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。

 

Lambert-Beer定律：A=εbc，（A為吸光度，ε為摩爾吸光系數，b為液池厚度，c為溶液濃度）。即物質在一定濃度下的吸光度與它的吸收介質的厚度成正比。基于該定律，可以對溶液進行定量分析。

 

二、主要構造

 

光源：提供足夠強度的、穩定的連續光譜。紫外光區通常用氫燈或氘燈，可見光區通常用鎢燈或鹵鎢燈。

 

單色器：將光源發出的復合光分解并從中分出所需波長的單色光。色散元件有棱鏡和光柵兩種，它是分光光度計的心臟部分。

 

吸收池：又稱比色皿，供盛放試液進行吸光度測量之用。可見光區的測量用玻璃吸收池，紫外光區的測量須用石英吸收池。

 

檢測器：通過光電轉換元件檢測透過光的強度，將光信號轉變成電信號。常用的光電轉換元件有光電管、光電倍增管及光二極管陣列檢測器。

 

信號顯示系統：將檢測器輸出的信號放大并顯示出來。

 

三、分類

 

按光路系統：可分為單光束和雙光束分光光度計。

 

按測量方式：可分為單波長和雙波長分光光度計。

 

按繪制光譜圖的檢測方式：可分為分光掃描檢測與二極管陣列全譜檢測。

 

四、主要應用

 

定量分析：廣泛用于各種物料中微量、超微量和常量的無機和有機物質的測定。

 

定性和結構分析：紫外吸收光譜還可用于推斷空間阻礙效應、氫鍵的強度、互變異構、幾何異構現象等。

 

反應動力學研究：研究反應物濃度隨時間而變化的函數關系，測定反應速度和反應級數，探討反應機理。

 

溶液平衡的研究：如測定絡合物的組成、穩定常數、酸堿離解常數等。