會(huì)員.png)
10
當(dāng)前位置：東曹（上海）生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>離子交換色譜柱的優(yōu)點(diǎn)及其保養(yǎng)方法
離子交換色譜柱的優(yōu)點(diǎn)及其保養(yǎng)方法
離子交換色譜是指離子交換色譜柱的固定相中含有帶電基團(tuán)，這些帶電基團(tuán)通過(guò)靜電相互作用與樣品中帶相反電荷的離子結(jié)合，如果流動(dòng)相中存在其它帶相反電荷的離子，當(dāng)樣品進(jìn)入色譜柱后，樣品離子便與流動(dòng)相離子相互競(jìng)爭(zhēng)固定相表面的電荷位置，并因競(jìng)爭(zhēng)力的差異使樣品組分得到分離。
離子交換色譜柱的優(yōu)點(diǎn)是：
1、具有開(kāi)放性支持骨架，大分子可以自由進(jìn)入和迅速擴(kuò)散，故吸附容量大。
2、具有親水性，對(duì)大分子的吸附不大牢固，用溫和條件使可以洗脫，不致引起蛋白質(zhì)變性或酶的失活。
3、多孔性，表面積大、交換容量大，回收率高，可用于分離和制備。
主要保養(yǎng)方法如下：
（1）首先在開(kāi)始使用系統(tǒng)以前檢查柱子有否微生物生長(zhǎng)，否則柱子會(huì)堵塞，柱壓會(huì)升高到無(wú)法接受的水平。然后，不接檢測(cè)器，正向安裝色譜柱，使用純甲醇以0.6ml/min流速?zèng)_洗約5倍柱體積。
（2）再連接檢測(cè)器，用純甲醇以0.6ml/min流速?zèng)_洗約10倍柱體積。
（3）然后使用去離子水以0.6ml/min流速?zèng)_洗約10倍柱體積。
（4）好再確保連接好保護(hù)柱（多使用相應(yīng)柱制造商針對(duì)性提供的保護(hù)柱），再用選用的洗脫液以0.6ml/min流速平衡1h以上，進(jìn)樣檢測(cè)。同樣，若洗脫液中含有緩沖鹽類，在用分析洗脫液平衡之前，先用不含緩沖鹽的同比例洗脫液過(guò)渡，沖洗約10倍柱體積，避免緩沖鹽在分析柱內(nèi)析出。
（5）分析完畢，凈化程序基本同C18柱，先用去離子水以0.6ml/min流速?zèng)_洗約20倍柱體積→然后用甲醇以0.6ml/min流速?zèng)_洗約10倍柱體積，純甲醇飽和后→密封保存即可。（注意：一定要確保在柱子內(nèi)沒(méi)有緩沖液或者其他含鹽類的洗脫液的情況下保存色譜柱。）
（6）長(zhǎng)時(shí)間保存后重新使用，重復(fù)上述（1）～（5）即可。
（7）使用并正確處理完畢，入庫(kù)保存于防塵環(huán)境下，登記備案。