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            技術文章

            幸福瞬間,滬鼎與您分享ELISA試劑盒制備的那些事

            閱讀:1015          發布時間:2018-8-9

              晨曦徐徐拉開了帷幕,又是一個絢麗多彩的早晨,帶著清新降臨人間。在這個美好的早晨,上海滬鼎為您分享ELISA試劑盒的制備必須標準化的那些事,了解它對你有益無害哦!
              我公司代理供應的RD、TSZ、BIM品牌ELISA試劑盒已經遠銷全國各地,主要用于實驗室科研使用。我公司試劑盒優勢:先進、完善、穩定,提供免費代檢測服務。
              在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA試劑盒中,有些作者定出S/N為陽性標準,現多為各種測定所沿用。
              實際上每一測定系統應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液,以致反應后產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數,以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。ELISA試劑盒用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,陽性和陰性的對照品應符合一定的規格,須配用精密的儀器,并嚴格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。
              現舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(P-N)必須大于一個特定的數值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算: 
              陽性判定值=NCX+0.05 標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數,只適合于該特定條件下,ELISA試劑盒而不是對各種試劑均可通用。
              上海滬鼎生物由資深專家帶頭組建研發團隊,十幾年ELISA試劑盒開發經驗,品質保障,值得信賴;BIM品牌度高,國內重點實驗室廣泛使用,如北京生命科學研究所,中國科學院,協和醫科大學等;諸多刊物的文章廣泛引用,如Nature, PNAS, Cell Research, Biomaterials等,目前SCI文章及國內核心期刊引用已達數百篇。專業技術團隊提供完備的售前及售后服務,確保您實驗成功!

                                 

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