在做ELISA實驗中，相信大家或多或少難免會出現一些狀況，就在上周五，小編就在貼吧看到有個吧友發帖問在做ELISA實驗，到顯色步驟結束后，酶標板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色。那么今天上海勁馬請咱技術人員給大家分析分析

 

原因分析：試劑已過有效期，或不同試劑盒組分混用，檢查試劑的組分及批號，確認未過期以及所有組分均屬對應的試劑盒。

 

對策：不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用。                          

 

整板的黃板現象可能是由于錯加其他試劑造成，如同時操作兩對半試劑時，測HbsAb板用于測HBsAg等；實驗前檢查試劑的組分及批號，確認所有組分均屬于對應的試劑盒。如盛標本的試管四周常有血痂，易脫落，應遠離酶標板。

 

elisa試劑盒超過有效期的產品可能會產生很弱的信號；試劑盒沒有按規定進行留存，受高溫影響；實驗前檢查試劑的組分及批號，確認試劑未過期。孵育溫度應控制在37-38℃，孵育時間嚴格按照說明書操作，保溫期內不宜多開門，以免影響保溫。花板，一般是由于臨床標本的收集、處理和留存方法不當造成，放置時間(自然放置1~2h)及離心轉(3000r/min)、離心時間(15min)應引起注意。

 

試劑、樣品用前未平衡至室溫從低溫冰箱中取出的試劑及樣品應置室溫平衡，20分鐘左右。錯加、漏加試劑底物、顯色劑A或B嚴格按說明書的步驟操作，加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致，以減少漏加現象。實驗結束后，陰陽性對照正常，質控正常，但臨床標本感覺顯色較弱，待測標本中可能不含強陽性標本，故結果可能是正常的，如有懷疑，可復檢標本加入疊氮鈉作為防腐劑，酶免實驗中的標本禁用疊氮鈉作為防腐劑，可選用 proclin、硫柳汞等其他防腐劑，陰陽性對照正常，但質控、參考品或個別弱陽性標本未能檢出