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            滬鼎教您正確操作小鼠β淀粉樣蛋白elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)

            閱讀:844          發(fā)布時(shí)間:2014-4-22
            提 供 商 上海滬鼎生物科技有限公司 資料大小 93KB
            資料圖片 下載次數(shù) 112次
            資料類型 PNG 圖片 瀏覽次數(shù) 844次
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            品牌:RD TSZ

            規(guī)格:96T 48T
            :葉()
            保存:;2-8℃。
            有效期:6個(gè)月
            供應(yīng)商:上海滬鼎生物科技有限公司

            1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
            1000μg/L    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
            500μg/L    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
            250μg/L    3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
            125μg/L    2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
            62.5μg/L    1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
            2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
            3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
            4、配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
            5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
            6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 
            7、溫育:操作同3。
            8、洗滌:操作同5。
            9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
            10、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
            11、測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
                應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本水平。用純化抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度。 
                清明剛一過(guò),五一又迎來(lái),上海滬鼎生物新品“小鼠elisa試劑盒”已隆重上市!我公司代理美國(guó)RD、TSZ等ELISA試劑盒,規(guī)格:48T/96T,訂購(gòu)或了解本新品,歡迎您。

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