小吸頭上的大學問（之二）—吸附性

     在移取低表面張力的液體（如含有清潔劑的試劑等）時，移液器吸頭的內壁上通常會留下一層肉眼難以察覺的液體薄膜。這種液體殘留的存在會導致移液結果的不一致和不準確，并造成珍貴樣品的損失。

     近年來，各種品牌紛紛推出低吸附吸頭，希望能盡量減少這種殘留對實驗造成的影響。以下用不同供應商制造的低吸附吸頭處理含有清潔劑的液體，觀察吸頭內的液體殘留量，對比低吸附吸頭的性能。

材料

Sartorius Optifit 標準吸頭：200μ、350μl
Sartorius Optifit 低吸附吸頭：200μl、350μl
Sartorius Saftyspace 低吸附濾芯吸頭：120μl
其他供應商低吸附吸頭：200μl、300μl
其他供應商低吸附濾芯吸頭：200μl
Sartorius Picus電動移液器： 10-300μl，以4檔速度吸液、1檔速度排液
Sartorius mLINE 手動移液器：20-200μl
清潔劑溶液：0.1% Triton X-100，10% Tween 20，10% SDS，染色 10X PCR 緩沖液（含有清潔劑、密度試劑和跟蹤染料）
Sartorius MC5 微量天平，Sartorius 分析天平BP211D

重量分析法

     在移液后使用重量分析法對移液器吸頭中的液體殘留量進行測量。將裝滿試劑的小玻璃容器放在天平上，將重量設置為零。然后從容器中吸取一定量的試劑再把它釋放回去，記錄顯示吸頭中液體殘留量的天平讀數。針對上面列出的每個清潔劑溶液重復此項操作。

液體殘留量對比

     移取常用的清潔劑溶液時，對比 Sartorius 的標準吸頭和低吸附吸頭與其他 5 個供應商的低吸附吸頭的性能。對所有液體進行測試后發現，Sartorius 低吸附吸頭的液體殘留量zui低（圖 1a）。某些其他廠商的低吸附吸頭的性能甚至還不如 Sartorius 的標準吸頭，這表明市場上的低吸附吸頭之間存在著顯著的性能差異。

圖 1a 液體殘留量對比。
我們通過對下列清潔劑進行 200 μl 的移液時，將 Sartorius 標準吸頭和低吸附吸頭與其他 5 個供應商的低吸附吸頭與進行了對比，這些清潔劑包括：10% Tween 20、0,1% Triton X-100 和 10% SDS。我們使用的是10-300μl 的Picus電動移液器，吸頭容量為200 μl、300 μl 和 350 μl（其規格取決于各個供應商的產品規格和兼容性）。用重量分析法對吸頭中的液體殘留量進行測量。對每個供應商的 10 個吸頭進行重復測試。

     在另一個實驗中，將含染色清潔劑的 PCR 緩沖液用作測試試劑，以對比不同低吸附吸頭移液的性，并觀察移液量如何影響吸頭中的液體殘留。如圖 1b 所示，Sartorius 低吸附吸頭的殘留量zui小。Sartorius 標準吸頭的液體殘留量甚至接近于某些廠商的低吸附吸頭的殘留量。使用 Sartorius低吸附吸頭可獲得*移液性，有力說明了這種吸頭在PCR 等應用中的優勢。該數據還顯示，標準吸頭和低吸附吸頭在液體殘留量上的差異隨著移液量的增加而變大。原因是液體會吸附在吸頭內部更大的表面上。

圖 1b 對不同容量的染色PCR緩沖液進行移液，比較被測低吸附吸頭的液體殘留量及移液性。 
將 5 個其他供應商的低吸附吸頭與 Sartorius 標準吸頭和低吸附吸頭（濾芯和非濾芯）進行對比。 使用容量為120 μl、200 μl 和 300 μl（其規格取決于每個供應商的產品規格和兼容性）的移液器吸頭與 Sartorius mLINE®20-200 μl 對染色 PCR 緩沖液進行 20 μl 和 120 μl 的移液。使用重量分析法對吸頭中的液體殘留量進行測量。對每個供應商的10 個吸頭進行重復測試。誤差線代表標準偏差。

結論：

     低吸附吸頭在移取含有清潔劑的液體時比普通吸頭具有明顯的優勢，能大大減少移液后吸頭內的液體殘留量。同時結果也表明，市場上的各種低吸附吸頭在性能方面存在顯著的差異。比較各種低吸附吸頭，Sartorius低吸附吸頭能確保*的樣品回收率。