熱滅活自體血漿，56°C，30min。離心， 800 xg ， 20 min，去除沉淀。4°C 保存上清血漿，培養備用。
至少5倍體積的PBS（不含鈣鎂）清洗PBMCs。室溫離心500xg，10min，收集PBMCs。 PBMCs稀釋到 1 x 106 cells/mL，使用NK活化培養基配比1.8mL NK活化添加劑和10%自體血漿。
預包被T-75培養瓶使用前，用PBS（不含鈣鎂）清洗兩次。添加30 mL PBMC懸液到預包被T-75培養瓶，37°C，5% CO2培養。

注意：第六天之前，如果培養基變黃，細胞密度超過2.0 x 10⁶ cells/mL，需要添加新鮮的NK活化培養基配比10%自體血漿，保持細胞密度在在5 x 10⁵到 2.0 x 10⁶ cells/mL之間。

NK細胞擴增

培養第六天，培養液離心，適量NK擴增培養基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）重懸細胞，再轉移到T-225培養瓶或透氣細胞培養袋。
每隔兩三天，根據細胞擴增狀態，培養體系中添加新鮮的NK擴增培養基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）保持細胞密度在5 x 10⁵到 2.0 x 10⁶ cells/mL之間。
細胞總量到達2 x 10⁹后收獲細胞用于CCK8 殺傷力和免疫表型檢測。

注意：整個實驗過程中，細胞懸液吹打和培養容器拍打都要輕柔，以避免細胞損傷，保持細胞活性。

Corning® NK細胞活化擴增培養套裝

英文名：Corning® NK Expansion Kit

中文名：Corning® NK細胞活化/擴增培養套裝

應用：NK細胞活化擴增

品牌產地：美國Corning

保存：2°C - 8°C

NK細胞是當今免疫治療常用的細胞。但是NK細胞培養操作難度大，對培養條件、培養技術要求很高，難以獲得高純度能的活性細胞。 Corning NK細胞活化/擴增培養基套裝由多個組分組成，為 NK細胞培養提供簡便的操作方案。使用該套裝所獲得細胞數量產量高，活性高，具有很高的殺傷效應。

產品組成

NK細胞活化培養基

NK細胞活化添加劑

NK細胞擴增培養基

抗體預包被T75細胞培養瓶

細胞培養袋

產品特色

擴增能力強，在14天內可達到100倍擴增

效應細胞比例高，可達80％

操作方便

產品訂購信息

品牌	貨號	產品描述	包裝
Corning	88-570-kit	NK Kit for activation and expansion of human natural killer cells NK細胞活化/擴增培養基套裝	1Kit
套裝包含	活化用	Pre-coated T-75 flask 抗體預包被T75細胞培養瓶	1瓶
		NK primary medium NK細胞活化培養基	1×50 mL
		NK primary supplement NK細胞活化添加劑	1×1.8 mL
	擴增用	Expansion medium NK細胞擴增培養基	1×1000 mL
	配件	細胞培養袋	1 x 640 cm²

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