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Lonza LT07-710 支原體檢測試劑盒使用指南
閱讀：3526發布時間：2021-1-8
產品名稱：MycoAlert™ PLUS 支原體檢測試劑盒
產品貨號： LT07-710
MycoAlert™ PLUS支原體檢測試劑盒 產品介紹：
MycoAlert™ PLUS Assay是一種精選生物化學檢測方法，用于檢測細胞培養過程中的支原體污染問題。支原體是一種能夠自我復制的小的原核微生物，和其他細菌不同的是它們沒有細胞壁，所以細胞形態不固定，可以有多種變化，可以在培養基上形成極小的菌落。支原體是寄生生物，但同時也具有腐生功能。細胞培養過程中的污染支原體會使細胞生長變慢，影響細胞活性變化。新一代MycoAlert™ PLUS Assay可以檢測出所有6種支原體屬，多達180種支原體。與MycoAlert™支原體檢測試劑盒相比有更高的靈敏度和準確性。操作簡單快速，只需兩步移液操作，20分鐘內就可得出結果。適合用于檢測的樣品包括細胞上清液、未啟用培養基、10%-20% FCS或FBS、L-谷氨酰胺、青霉素-鏈霉素混合物、中性胰蛋白酶、慶大霉素/兩性霉素B等。
檢測原理
檢測樣品中的活性支原體裂解后，釋放出的酶與MycoAlert™ PLUS Substrate反應，催化ADP轉化為ATP。加入MycoAlert™ PLUS Reagent試劑后在熒光素酶作用下ATP產生光信號(ATP+ Luciferin + O2 →Oxyluciferin + AMP + PPi + CO2 + LIGHT)。光信號可用光度計讀出，根據第二次讀數(Read B)與次讀數(Read A)比率可是確定是否存在支原體污染。Read B/Read A比率<1, 支原體陰性，無支原體；1-1.2，不確定是否存在支原體，需重新檢測；>1.2，支原體陽性，存在支原體污染。
產品優點：
» 生物發光技術，無需DNA提取物
» 樣品檢測只需兩步移液操作，結果分析簡單
» 可以和低靈敏性的板光度計或多功能讀數器配用
» 可用于檢測未啟用培養基，培養基補充物或水溶液
» 快速方便，標準程序20分鐘就可出結果
» 通用性強，可檢測所有常見的支原體污染(不含脲原體屬)
組成成份：
• MycoAlert™ PLUS 試劑（凍干） 1 x 10 ml (LT27-286)
• MycoAlert™ PLUS 底物（凍干） 1 x 10 ml (LT27-289)
• MycoAlert™ PLUS 檢測緩沖液 1 x 20 ml (LT27-292)
支原體檢測試劑盒(MycoAlert Mycoplasma Detection Kit) 定義：支原體（mycoplasma），又稱霉形體，沒有細胞壁的原核生物，為目前發現的小的原核生物。支原體細胞中*可見的細胞器是核糖體（支原體是原核細胞，原核細胞的細胞器只有核糖體）。它對許多抗生素具有抗性，如類胸膜肺炎微生物。
一.支原體污染成為細胞培養的重大隱患:
1．研究表明，世界范圍內超過15%的培養細胞都有支原體污染。
2．支原體污染會對細胞造成多方面的影響，包括代謝、免疫或生化特性、生長狀況、以及細胞存活等多方面的改變。
3．支原體污染會影響實驗結果的穩定性、可靠性和準確性。
4．支原體難以檢測，同時也很難消除。支原體能輕易地通過標準濾膜，同時也能拮抗絕大多數的抗生素，給細胞培養造成巨大損失。
二.常規檢測才能有效避免細胞支原體污染:
1．常規性的進行支原體檢測是保證細胞培養中不受到支原體污染影響的*途徑。
2．傳統的支原體檢測方法需要在特殊的選擇性培養基作用下對樣品進行培養，時間往往達數周，費時，費力并且無法獲得足夠的靈敏度和特異性。
三、檢測原理
美國Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原體檢測試劑盒是利用支原體酶的這一特定活性，進行選擇性的生物化學檢測。這些酶的存在提供了一種快速的篩選操作，能靈敏地檢測出樣本中的支原體污染。這些存活的支原體被溶解，然后釋放出來的酶與支原體檢測試劑盒中提供的底物發生催化反應，將ADP轉化成ATP。通過測量樣品中添加底物前后ATP的含量，可以得到一個比率，該比率指示支原體是否存在。如果這些酶不存在，第二次讀數相對于讀數就沒有增加；如果酶與底物進行特異性反應，就會導致ATP含量上升。ATP含量的上升通過生物發光化學反應可以檢測到，其公式如下：Luciferase ATP + Luciferin + O2 ——————> Oxyluciferin + AMP Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT這個反應的發生是在室溫(18°C～22°C)進行的，也是熒光素酶反應的*溫度。在支原體檢測試劑盒的檢測原理中，*通過分光光度計讀數，由于發出光的強度與ATP的濃度成線性關系，因此可檢測支原體的污染問題。
Lonza支原體檢測試劑盒的產品特征Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原體檢測試劑盒是專門檢測細胞培養過程中是否被支原體污染的經典試劑盒，它包含檢測所用到的各種試劑和產品操作手冊。該支原體檢測試劑盒具有操作簡單、快速高效、結果穩定可靠、靈敏度*等優點，讓您在支原體檢測時輕松容易，并確保您的培養潔凈無污染。
四.推薦Lonza（原Cambrex）公司 MycoAlert 支原體檢測試劑盒:采用發光檢測，更能快速反映細胞培養中的支原體污染。避免支原體造成的損害，省力。
1．快速--20分鐘就可以得到結果。
2．敏感度--可檢測極少量的支原體。
3．簡易--僅混合2種試劑和您的樣品，將2種讀數放到照度計上就可以得到確切結果。
4．完整--試劑盒包括檢測用所需要的全部試劑！
訂購信息：
貨號 描述
• LT07-701 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 10Tests
• LT07-703 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 30Tests
• LT07-705 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 50Tests
• LT07-710 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 100Tests
• LT07-518 MycoAlert™ Assay Control Sets, 10Tests
• LT27-292 MycoAlert™ Assay Buffer, 20ml
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