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高效液相色譜儀常用的脫氣方法有如下幾種：
1.吹氦脫氣法：
利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性，在0.1MPa 壓力下，以約60mL/min 流速通入流動相儲液容器中10～15min，可以很有效地從流動相中排除溶解的空氣，能排除接近80%的氧氣。高效液相色譜儀采用一個高效分布式噴射流裝置，一體積的氦氣可從流動相中將等體積的幾乎全部氣體排除。這意味著1L氦氣通過1L流動相就可完成排氣這個工作。這種脫氣方法雖然好，但我們國內氦氣價格較高，很少有實驗室采用此方法。
2.加熱回流法：
此法的脫氣效果較好。在操作時要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑會丟失，混合流動相的比例會有變化。
3.抽真空脫氣法：
此法可使用真空泵，降壓至0.05～0.07MPa 即可除去溶解的氣體。但是由于高效液相色譜儀真空脫氣會使混合溶劑組成發生變化，從而影響到實驗的重現性，因此多用于單溶劑體系的簡單分析。
4.超聲波脫氣法：
將欲脫氣的流動相置于超聲波清洗器中，用超聲波震蕩10～20min。此法用于高效液相色譜儀脫氣效果最差。
5.在線脫氣法：
現在商品的HPLC 儀器，均可配在線脫氣機。在線脫氣使用簡單，低故障，有效。建議購買儀器時一定要購買，有的公司是作為選購件，所以與儀器公司談配置時應與公司確認。
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