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            麥康凱瓊脂培養基介紹

            閱讀:698          發布時間:2025-5-7

            麥康凱瓊脂培養基(MacConkey Agar,MAC)全面解析

            一、基本介紹

            麥康凱瓊脂培養基是一種選擇性及鑒別性培養基,由Alfred Theodore MacConkey于1905年研制,主要用于腸道致病菌的分離與鑒定。其核心設計邏輯為:

            • 選擇性抑制:通過膽鹽抑制革蘭氏陽性菌(如葡萄球菌、鏈球菌),但允許部分腸球菌及沙門氏菌生長;

            • 鑒別功能:利用乳糖發酵差異,通過指示劑顏色區分細菌代謝特性。

            二、核心成分與配方


            成分作用機制
            蛋白胨、脙胨提供碳源、氮源、維生素及生長因子,支持細菌基礎代謝。
            膽鹽(豬/牛/羊)抑制革蘭氏陽性菌,但對沙門氏菌、志賀氏菌等腸道致病菌抑制較弱。
            乳糖作為發酵底物,分解產酸(如大腸埃希菌)或不分解(如沙門氏菌)。
            中性紅pH指示劑,發酵乳糖產酸時菌落呈桃紅色,并形成膽鹽沉淀環。
            結晶紫增強對革蘭氏陽性菌(如腸球菌、葡萄球菌)的抑制,減少干擾。
            氯化鈉維持滲透壓平衡,確保細菌正常生長。
            瓊脂凝固劑,形成固體培養基表面。


            典型配方(每升)

            • 蛋白胨 20g、乳糖 10g、氯化鈉 5g、膽鹽 5g、中性紅 0.03g、瓊脂 14g,pH 7.2±0.2。

            三、作用機制與鑒別原理

            1. 選擇性抑制

              • 膽鹽破壞革蘭氏陽性菌細胞膜,抑制其生長;

              • 結晶紫進一步增強對腸球菌和葡萄球菌的抑制,但沙門氏菌等腸道菌可耐受。

            2. 乳糖發酵鑒別

              • 發酵乳糖菌(如大腸埃希菌):產酸使菌落呈桃紅色,周圍形成膽鹽沉淀環(因酸與膽鹽反應)。

              • 不發酵乳糖菌(如沙門氏菌、志賀氏菌):菌落無色或淡黃色,無沉淀環。

              • 遲緩發酵菌(如宋內志賀氏菌):菌落中心偏紅,邊緣無色。

            四、應用場景

            1. 臨床檢驗

              • 糞便、分泌物中腸道致病菌(沙門氏菌、志賀氏菌、致瀉性大腸桿菌)的分離;

              • 腸球菌的篩選與鑒定。

            2. 科研應用

              • 耐藥菌株篩選(如添加壯觀霉素篩選鴨源沙門氏菌);

              • 菌株融合研究(如通過抗藥性標記篩選融合菌株)。

            3. 特殊改良配方

              • 低鹽MAC:減少氯化鈉以抑制變形桿菌蔓延生長;

              • 山梨醇MAC:替換乳糖用于分離O157大腸埃希氏菌(不發酵山梨醇);

              • 含抗生素MAC:添加氨芐青霉素、多粘菌素B等篩選特定耐藥菌。

            五、制備方法

            1. 配制

              • 稱取54g培養基干粉溶于1L蒸餾水,加熱煮沸至溶解。

            2. 滅菌

              • 分裝后121℃高壓滅菌15分鐘,滅菌后搖勻防止瓊脂沉積。

            3. 傾注平板

              • 冷卻至50-55℃時加入滅菌的結晶紫和中性紅溶液,混勻后傾注平板。

            六、使用注意事項

            1. 樣本處理

              • 糞便、分泌物等可直接接種,固體樣本需稀釋后涂布。

            2. 培養條件

              • 35-37℃培養18-24小時,觀察菌落顏色與形態。

            3. 結果解讀

              • 結合生化試驗(如吲哚試驗、氧化酶試驗)和血清學試驗進一步鑒定。

            4. 局限性

              • 某些特殊需求菌株(如嚴格厭氧菌)可能無法生長;

              • 需定期驗證培養基性能(如接種大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌驗證選擇性)。

            七、總結

            麥康凱瓊脂培養基通過膽鹽抑制與乳糖發酵指示,實現了對腸道致病菌的高效分離與鑒別。其成分可調、用途廣泛,是臨床微生物檢驗和科研中的工具。隨著研究深入,改良配方不斷拓展其應用場景,為微生物學研究提供了有力支持。


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