近年來，研究人員陸續報道了采用營養素、生長因子和激素取代血清，在無血清培養基中培養各種細胞系的方法。Mather和Sato（BBRC, 1985）報道在含有胰島素、轉鐵蛋白、表皮生長因子、黃體生成素或促卵泡激素、生長調節素和生長激素的無血清培養基中，成功培養了Leydig和Sertoli細胞。

　　

　　盡管其中的激素及其濃度專用于特定的細胞類型，但人們還是發現杜氏改良Eagle培養基（DMEM）與Ham's F-12營養混合液的1：1混合物適于這類研究。這種混合物名為 DMEM/F12培養基，含有21種氨基酸、10種維生素、葡萄糖、鐵和鋅等成分。

　　

　　Sigma-Aldrich旗下的DMEM/F12是比DMEM更加營養和復雜的培養基。配方中可加入HEPES緩沖液（終濃度15 mM）補償無血清造成的緩沖能力損失。這種合成培養基不含任何血清、蛋白質、脂質或生長因子，因此需要根據細胞培養類型補充胎牛血清(FBS)等營養成分。某些商業配方可能含有谷氨酰胺或酚紅。

　　

　　Sigma-Aldrich DMEM/F12 培養基的應用

　　

　　改良后的DMEM/F12基礎培養基通常用于需要低血清或無血清的培養應用，如三維類器官培養或干細胞培養。DMEM/f12 培養基還可用于優化需要低血清或無血清條件的細胞轉染。

　　

　　除了通常需要低血清或無血清環境的干細胞培養，原代細胞也可在 DMEM/F12 培養基中培養，其中包括成纖維細胞、MDCK 細胞、神經細胞系、神經膠質細胞和平滑肌細胞。與補充高濃度血清的原代細胞相比，它們表現出同等或更生長趨勢和功能。用 DMEM/F12 培養基培養的細胞也顯示出與高血清條件下培養的細胞相同的細胞形態。