第一步: 打開軟件，分別在A(X)列和B(Y)列輸入標準品濃度和標準品OD值。

第二步：選擇擬合曲線類型

選中上步輸入的數值，按如下操作依次點擊選項。

第三步：在左側選擇<Find X/Y>，右側勾選< Find X from Y>。完成上述操作后，點擊Fit按鍵，擬合曲線和相關信息將自動生成。

第四步：查看標準曲線信息（如參數值，R-Square等）

第五步：根據標準曲線計算樣本濃度

選擇第四個工作表<Fit NLF Find X from Y1>，在左側A1（Y）輸入樣本的OD值，對應的濃度將在右列自動生成。

第一步：將標準曲線數據在Excel表格中整理成兩列，第一列是濃度，第二列是平均OD值。

第二步：打開ELISA Calc軟件，復制Excel中數值部分，點軟件的<粘貼>；選擇<回歸/擬合模型>，一般優先選擇Logistic曲線擬合（四參數）、直線回歸或二次曲線回歸；點擊<回歸/擬合>。

第三步：點<由Y計算X值>，將樣本OD值在Excel中整理成一列，右鍵選復制，然后點軟件的<粘貼>，點軟件的<復制>，即可將計算的結果到Excel中粘貼。