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?為了實現成功的細胞培養(yǎng)，須分析各類可用細胞的優(yōu)缺點，了解哪類細胞能提供最有益的產出。

• 貼壁細胞

貼壁細胞在培養(yǎng)皿上單層生長。在傳代過程中，必須使用分離劑（如胰蛋白酶或細胞消化液）將這些細胞分離；而通常情況下，它們會在接種后2-4小時內重新粘附到孔板上。

• 懸浮細胞（即淋巴母細胞樣細胞）

不會粘附在培養(yǎng)皿表面，而是懸浮在培養(yǎng)基中。它們通常成團生長，尤其是在密度較高處。

• 原代細胞

從其原生組織中直接分離并體外培養(yǎng)。常用的原代細胞包括通過皮膚活檢直接從患者體內分離出的成纖維細胞、從胚胎期或出生后的小鼠或大鼠的大腦特定區(qū)域離解出的神經元，以及從患者血液樣本中分離出的紅細胞。

• 永生化細胞系

與原代細胞一樣來源于組織樣本，但已經歷過永生化，細胞系可以多次傳代而不喪失活性，并繞開與原代細胞相關的倫理規(guī)范。細胞系通常易于培養(yǎng)，還可在液氮中冷凍以長期儲存，并在日后復蘇（解凍）以繼續(xù)使用。

• iPSC

誘導多能干細胞（簡稱iPSC或iPS細胞）衍生自血液或皮膚，已被重新編程為多能性干細胞（或胚胎樣干細胞），這意味著它們可以分化成任何類型的人體細胞。在不同的發(fā)育階段添加特異性生長因子可以使細胞分化成所需的類型。

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細胞培養(yǎng)中的許多挑戰(zhàn)都源于不良的液體處理技術，而通過優(yōu)化移液器選擇，減少所需的處理步驟并規(guī)范移液操作，可以改善或避免這些挑戰(zhàn)。

以下幾個特點需特別注意：

01 無菌性

細胞培養(yǎng)中使用的液體處理設備和耗材可能會滋生許多微生物。遵循以下建議可降低液體處理設備與細胞之間交叉污染的概率：

• 細胞培養(yǎng)中使用的設備（包括單通道、多通道移液器和連續(xù)分配器）應專用于其對應區(qū)域

• 在細胞培養(yǎng)設施中使用任何移液器之前，先用70%的酒精對其移液端進行消毒，并盡可能使用無菌濾芯吸頭

• 計劃定期清潔儀器的內部組件

• 定期對儀器進行維修保養(yǎng)，以驗證其內部組件的完整性（即確保無腐蝕、破損組 件等）

• 定期更換電動助吸器的濾芯

02 可重現性

培養(yǎng)參數、細胞處理、細胞接種和細胞活性也會影響細胞培養(yǎng)實驗的可重現性。對于儀器，用戶必須驗證以下幾點：

• 制造商技術規(guī)格：系統(tǒng)誤差和隨機誤差

• 移液器的完整性：確保無部件缺失或破損、內部腐蝕等

• 定期校準服務：服務時間間隔越短，早發(fā)現破損情況的幾率就越高，移液器的使用也就越符合規(guī)范

03 速度和效率

在細胞培養(yǎng)環(huán)境中，務必迅速操作以保持細胞活性并避免細胞過長時間暴露在次優(yōu)條件下。這對于精細細胞系或已經受到壓力的細胞尤其重要！（例如從腦組織中分離出的原代神經元）

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