一、濾片Vs光柵

多功能酶標(biāo)儀的分類方法眾多，但zui簡(jiǎn)單的莫過于用他們的濾光方式來作分界線。一般來說，可以分為濾光片型和光柵型兩大類。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測(cè)，還是想用光柵的時(shí)候用光柵，該用濾片的時(shí)候用濾片;還有一些實(shí)驗(yàn)非用其中一個(gè)不可，另一模塊實(shí)現(xiàn)不了的。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起，并沒有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。

總體來說，濾片技術(shù)由于發(fā)展已久，配合二向色鏡(其實(shí)也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng)，可以實(shí)現(xiàn)大部分實(shí)驗(yàn)的需要。

二、雜光率&波長(zhǎng)準(zhǔn)確性

光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流，多家廠家共同努力，已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中，zui關(guān)鍵的無疑就是光柵的雜光率和波長(zhǎng)選擇的準(zhǔn)確性了。

雜光率指得就是光源通過光柵后，得到的光線中，“不需要”的波長(zhǎng)的光占所標(biāo)稱波長(zhǎng)的光的比例，表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復(fù)雜性，無論使用濾光片還是光柵，雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來說，濾光片型的雜光率在10-4——10-5之間，光柵型的可以做到10-6——10-7。由于此類雜光是非特異的，而且會(huì)直接進(jìn)入zui后的檢測(cè)器，所以有多少的雜光就會(huì)引入多少的隨機(jī)誤差。在熒光等檢測(cè)過程中，由于檢測(cè)器存在放大效應(yīng)，雜光率的干擾也會(huì)被指數(shù)級(jí)放大。因此，雜光率就是一個(gè)濾光系統(tǒng)的首要性能指標(biāo)。

光柵的另一個(gè)重要指標(biāo)就是波長(zhǎng)選擇的準(zhǔn)確性。因?yàn)楹芏鄼z測(cè)是依賴于物質(zhì)在某個(gè)波長(zhǎng)的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測(cè)定，實(shí)際檢測(cè)波長(zhǎng)偏離260nm幾個(gè)nm以上的話，OD值與zui終濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會(huì)發(fā)生改變。因此，一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng)，他的波長(zhǎng)選擇準(zhǔn)確性應(yīng)該是在±0.5——1nm之間。波長(zhǎng)偏離過大有時(shí)就會(huì)影響到zui終結(jié)果的準(zhǔn)確性。

這兩個(gè)可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)zui關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù)，直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測(cè)量的結(jié)果，是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的zui基本要求。

三、認(rèn)證>參數(shù)

在保證檢測(cè)可靠的基礎(chǔ)上，不同儀器的下一個(gè)差異就體現(xiàn)在檢測(cè)的靈敏度上面，這時(shí)人們關(guān)心的就是儀器能夠檢測(cè)到多弱的信號(hào)。

靈敏度涉及了整個(gè)光路系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和選料，很難說某一個(gè)部件會(huì)起決定性作用。但是有一點(diǎn)，在各種單功能檢測(cè)項(xiàng)目中，光吸收檢測(cè)用非放大型的光電二極管、熒光檢測(cè)用光電倍增管、發(fā)光檢測(cè)用專門設(shè)計(jì)的單光子計(jì)數(shù)光電倍增管，這三種不同的檢測(cè)器是各自檢測(cè)領(lǐng)域的優(yōu)先選擇。

四、比色杯+微量檢測(cè)

除了常規(guī)的6——384/1536孔酶標(biāo)板檢測(cè)之外，有些儀器還附帶了比色杯、微量檢測(cè)板等的兼容功能。無論是使用立式比色杯、臥式比色杯還是各種微量檢測(cè)板，其目的都是給光程不固定的酶標(biāo)板檢測(cè)引入一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)光程的概念。雖然酶標(biāo)板檢測(cè)也能通過光程校正等方式實(shí)現(xiàn)10mm光程OD值的換算，但這只是一個(gè)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換過程，檢測(cè)誤差累積較多，實(shí)際使用效果不佳。引入比色杯和微量檢測(cè)板后，光吸收的檢測(cè)光程就被固定在10mm或者0.5mm等的標(biāo)準(zhǔn)長(zhǎng)度，OD值換算更加簡(jiǎn)單和準(zhǔn)確。附帶了此類檢測(cè)功能的酶標(biāo)儀，相當(dāng)于除了本身的多功能酶標(biāo)檢測(cè)之外，還能替代部分分光光度計(jì)的功能，使其功能更加全面，儀器的性價(jià)比更高。