頂空氣相色譜法測定藥物中的有機溶劑殘留

  采用氣相色譜儀加FID檢測器和頂空進樣器測定原料藥中殘留量有機溶劑，是一種普遍采用的、穩定分析方法，同時具有較好的重現性和回收率。

  頂空氣相色譜法的原理是：利用被測樣品（氣-液和氣-固）加熱平衡后，取其揮發氣體部分進人氣相色譜儀。它于分析易揮發的微量成分，如對甲醇、乙醇等許多易揮發的有機溶劑類；不同季節的花香氣、香水類，帶有易揮發成分的中草藥類；特殊氣味的蔬菜和調味品類等均可用它進行定量分析。頂空氣相色譜與質譜聯用法是用于對未知的揮發成分進行定性分析的方法。

儀器與試劑

1.儀器：氣相色譜儀加FID檢測器；弱極性或中等極性氣相色譜柱；1-5uL微量注射器。

2.試劑：甲醇；乙腈；二氯甲烷；三氯甲烷；丙酮；正丙醇（均為分析純）；地塞米松磷酸鈉原料藥。

氣相色譜分析步驟

1.地塞米松磷酸鈉中丙酮的檢測

1.1溶液制備與測定

精密量取甲醇10μL（相當于7.9mg）與丙酮100μL（相當于79mg)，置于100mL容量瓶中，精密加0.1%(mL/mL）正丙醇（內標物質）溶液20mL，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液；另取本品約0.16g，精密稱定，置于l0mL容量瓶中，精密加入上述內標溶液2mL，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取上述溶液，照氣相色譜法，按正丙醇計算的理論板數應大于700。含丙酮不得過5.0%(g/g)，并不得出現甲醇峰。

1.2計算

按下式計算定量校正因子（f）和檢品中丙酮的含量：

定量校正因子（f)＝A丙醇/A丙酮×m丙酮/m丙醇

樣品中丙酮的百分含量=供試品中丙酮峰面積/供試品中正丙醇峰面積×fm丙醇/樣品取樣量/10×100%

式中A——峰面積，cm2;

m——質量，g。

2.頂空氣相色譜法測定有機溶劑甲醇、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷

2.1溶液制備

(1）取甲醇100μL、乙腈30μL、二氯甲烷10μL、三氯甲烷10μL，分別加不含有機物的純水至100mL，作為定位溶液。

(2）另取上述同樣量有機溶劑，混合，加無有機物的水至100.0mL，作為有機殘留溶劑的限度試驗對照溶液。取1mL對照溶液，加水至100.0ml,，測定有機溶劑的檢測限。

(3)取某藥物約0.3g，精密稱定，加3.0mL無有機物的水使溶解［如果樣品在水中不溶，可用適當濃度的二甲基甲酰胺（DMF）水溶液溶解樣品］，作為供試品溶液。

 2.2分離度與系統適用性試驗

取定位溶液在上述色譜條件下測定，記錄色譜圖和保留時間。取對照溶液重復進樣，計算各成分峰的分離度、柱效及色譜峰面積的相對標準差。另取對照溶液的稀釋液進樣，計算藥物中各有機溶劑的檢測限。參照下表格式記錄色譜參數：

 2.3計算含量

樣品測定取供試品溶液，在上述色譜條件下進樣，記錄色譜圖，外標法計算含量。

注意事項

1.氣相色譜儀色譜柱的使用溫度。各種固定相均有zui高使用溫度的限制，為延長色譜柱的使用壽命，在分離度達到要求的情況下盡可能選擇低的柱溫。開機時，要先通載氣，再升高汽化室、檢測室溫度和分析柱溫度，為使檢測室溫度始終高于分析柱溫度，可先加熱檢測室，待檢測室溫度近設定溫度時再升高分析柱溫度；關機前須先降溫，待柱溫降至50℃以下時，才可停止通載氣、關機。

2.進樣操作。為獲得較好的氣相色譜儀分析精密度和色譜峰形狀，進樣時速度要快而果斷，并且每次進樣速度、留針時間應保持一致。

3.檢測器的使用。為避免被測物冷凝在氣相色譜儀檢測器上而污染檢測器，檢測器的溫度必須高于柱溫30℃，并不得低于100℃。FID點火時應關小空氣流量和開大H2流量，待點燃后，慢慢調整到工作比例，一般空氣與氫氣的流量比為10:1，載氣（N2）與H2的流量比為(1：1)-（(1：1.5)。用峰高定量時，需保持載氣流速恒定。