液相色譜檢測(cè)方法的建立需要針對(duì)不同的樣品和分析目的，選用不同的分離模式和檢測(cè)器，充分發(fā)揮儀器性能，高效地達(dá)到分析目標(biāo)。通常使用單一檢測(cè)器直接檢測(cè)可達(dá)到目標(biāo)，必要時(shí)可衍生化后再檢測(cè)，或用多檢測(cè)器組合檢測(cè)。分離模式選擇與檢測(cè)器選擇的原則基本統(tǒng)一，即根據(jù)分析物結(jié)構(gòu)性質(zhì)初步判斷分離模式及流動(dòng)相的選擇：根據(jù)分析物結(jié)構(gòu)性質(zhì)、分離模式、樣品處理方式、流動(dòng)相的選擇等進(jìn)行檢測(cè)器的配套選擇。分離模式和檢測(cè)器的選擇是色譜方法開(kāi)發(fā)中不可分割的相互統(tǒng)一的重要環(huán)節(jié)。
關(guān)于分離模式和檢測(cè)器的選擇，
以下案例或可說(shuō)明一二
脂肪族生物胺檢測(cè)分析
脂肪族生物胺樣品特性：此類(lèi)物質(zhì)紫外可見(jiàn)光區(qū)吸收極弱，衍生化程序繁瑣效率低且易誤差損失，是水溶性的極性物質(zhì)。
方法開(kāi)發(fā)思路：根據(jù)這些基本條件，我們判斷可以選擇HILIC模式，ELSD檢測(cè)器直接檢測(cè)。
檢測(cè)效果見(jiàn)下圖：
月旭Ultimate® HILIC Amphion II
對(duì)四種脂肪族生物胺的分離
甘油酯檢測(cè)分析
甘油酯樣品特性：此類(lèi)物質(zhì)為脂溶性大，不溶于水或難溶于甲醇的非極性物質(zhì)。
方法開(kāi)發(fā)思路：這樣的物質(zhì)適用非水反相色譜法，案例見(jiàn)<非水反相色譜法應(yīng)用案例及注意事項(xiàng)>。
氨基酸檢測(cè)
氨基酸樣品特性：部分紫外吸收弱，大極性和水溶性。
方法開(kāi)發(fā)思路：可選擇衍生化法和非衍生化法。
兩種方法的分離效果見(jiàn)下圖：
月旭Ultimate® Amino Acid Plus
對(duì)23種氨基酸的非衍生法分離
月旭Ultimate® Amino Acid
對(duì)19種氨基酸的衍生化法分離
單糖寡糖類(lèi)分析
單糖寡糖類(lèi)樣品特性：水溶性的極性樣品，弱紫外可見(jiàn)吸收。
方法開(kāi)發(fā)思路：這類(lèi)物質(zhì)常選擇示差檢測(cè)器。
月旭Ultimate® XB-NH2 分析乳果糖
蛋白、RNA，病毒等樣品分析
蛋白、RNA，病毒等樣品特性：大分子。
方法開(kāi)發(fā)思路：選擇體積排阻色譜法。
月旭Xtimate® SEC-120 分析RNA
月旭Xtimate® SEC-2000
分析去致病基因的痘病毒
月旭Xtimate® SEC-300 分析IgG蛋白
關(guān)于流動(dòng)相的選擇，請(qǐng)延申閱讀<高效液相色譜中溶劑與檢測(cè)器的兼容性>。
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