目錄:合肥恩派爾貿易有限公司>>Abnbio感受態細胞>>表達 感受態細胞>> ABG207-50BL21-CodonPlus (DE3)-RIL 感受態細胞
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50X100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | ABG207-50 | 應用領域 | 環保,食品/農產品,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 感受態細胞 |
基因型
F– ompT hsdS(rB– mB–) dcm+ galλ(DE3)endAHte[argUileY leuW Camr ]
簡要說明
CodonPlus(DE3)-RIL菌株來源于Stratagene公司的BL21-Gold 菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，從而減少對重組蛋白的降解，補充大腸桿菌缺乏的4種稀有密碼子(AGA、AUA、CCC、CUA) 對應的tRNA （argU、ileY、leuW），提高外源基因，尤其是富含AT-的真核基因在原核系統中的表達水平。該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區（DE3區含有T7噬菌體RNA聚合酶），可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等質粒的蛋白表達，具有lu霉素抗性。BL21- Codon Plus(DE3)-RIL 感受態細胞由特殊工藝制作，經pUC19質粒檢測轉化效率高達108cfu/μg。
操作說明
1、取100μl冰上融化的AngYuBio BL21-CodonPlus(DE3)-RIL感受態細胞，加入目的質粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌2YT或LB培養基，混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。
注意事項
1、感受態細胞最好在冰上融化。
2.混入質粒時應輕柔操作。
3.轉化高濃度的質粒可相應減少最終用于涂板的菌量。
4.誘導時，IPTG濃度可選（0.1-2mM均可）。
5.為獲得需要量的蛋白，最佳誘導時間，溫度，IPTG濃度需實驗者優化。
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