由于客觀條件，任何光學系統都不能生成理論上理想的像，各種相差的存在影響了成像質量。下面分別簡要介紹各種影響自動聚焦顯微鏡成像的因素都有哪些？ 1、色差
色差是透鏡成像的一個嚴重缺陷，發生在多色光為光源的情況下，單色光不產生色差。白光由紅 橙 黃 綠 青 藍 紫 七種組成，各種光的波長不同 ，所以在通過透鏡時的折射率也不同，這樣物方一個點，在像方則可能形成一個色斑。
色差一般有位置色差，放大率色差。位置色差使像在任何位置觀察，都帶有色斑或暈環，使像模糊不清。而放大率色差使像帶有彩色邊緣。
2、球差
球差是軸上點的單色相差，是由于透鏡的球形表面造成的。球差造成的結果是，一個點成像后，不在是個亮點，而是一個中間亮、邊緣逐漸模糊的亮斑。從而影響成像質量。
球差的矯正常利用透鏡組合來消除，由于凸、凹透鏡的球差是相反的，可選配不同材料的凸凹透鏡膠合起來給予消除。舊型號顯微鏡，物鏡的球差沒有*矯正，應與相應的補償目鏡配合，才能達到糾正效果。一般新型顯微鏡的球差*由物鏡消除。
1、慧差
慧差屬軸外點的單色相差。軸外物點以大孔徑光束成像時，發出的光束通過透鏡后，不再相交一點，則一光點的像便會得到一逗點狀，型如慧星，故稱“慧差”。
2、像散
像散也是影響清晰度的軸外點單色相差。當視場很大時，邊緣上的物點離光軸遠，光束傾斜大，經透鏡后則引起像散。像散使原來的物點在成像后變成兩個分離并且相互垂直的短線，在理想像平面上綜合后，形成一個橢圓形的斑點。像散是通過復雜的透鏡組合來消除。
3、場曲
場曲又稱“像場彎曲”。當透鏡存在場曲時，整個光束的交點不與理想像點重合，雖然在每個特定點都能得到清晰的像點，但整個像平面則是一個曲面。這樣在鏡檢時不能同時看清整個相面，給觀察和照相造成困難。因此研究用顯微鏡的物鏡一般都是平場物鏡，這種物鏡已經矯正了場曲。
4、畸變
前面所說各種相差除場曲外，都影響像的清晰度。畸變是另一種性質的相差，光束的同心性不受到破壞。因此，不影響像的清晰度，但使像與原物體比，在形狀上造成失真。
（1） 當物體位于透鏡物方二倍焦距以外時，則在像方二倍焦距以內、焦點以外形成縮小的倒立實像；
（2） 當物體位于透鏡物方二倍焦距上時，則在像方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實像；
（3） 當物體位于透鏡物方二倍焦距以內，焦點以外時，則在像方二倍焦距以外形成放大的倒立實像；
（4） 當物體位于透鏡物方焦點上時，則像方不能成像；
（5） 當物體位于透鏡物方焦點以內時，則像方也無像的形成，而在透鏡物方的同側比物體遠的位置形成放大的直立虛像。
顯微鏡的成像原理就是利用上述（3）和（5）的規律把物體放大的。當物體處在物鏡前F-2F（F為物方焦距）之間，則在物鏡像方的二倍焦距以外形成放大的倒立實像。在顯微鏡的設計上，將此像落在目鏡的一倍焦距F1之內，使物鏡所放大的*次像（中間像），又被目鏡再一次放大，終在目鏡的物方（中間像的同側）、人眼的明視距離（250mm）處形成放大的直立（相對中間像而言）虛像。因此，當我們在鏡檢時，通過目鏡（不另加轉換棱鏡）看到的像與原物體的像，方向相反。
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