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——微生物培養基核心成分的專業解析
蛋白胨（Peptone）是一種由動物組織（如牛肉、酪蛋白）或植物蛋白（如大豆）經酶解或酸水解制備的氮源物質，廣泛用于微生物培養基的配制。其核心功能包括：
提供氮源：為微生物生長提供氨基酸、多肽及小分子肽類。
促進生長：含維生素、礦物質等微量成分，加速菌體代謝。
增強適應性：不同來源的蛋白胨可優化特定菌株的生長環境。
| 類型 | 原料來源 | 適用場景 | 特點 |
|---|---|---|---|
| 動物源蛋白胨 | 牛肉、豬骨 | 細菌、真菌培養（如大腸桿菌、酵母） | 氨基酸組成豐富，含維生素B族 |
| 植物源蛋白胨 | 大豆、小麥 | 乳酸菌、植物內生菌培養 | 低過敏原性，適合植物共生菌研究 |
| 酪蛋白胨 | 牛奶酪蛋白 | 分子生物學實驗（如質粒轉化） | 純度高，批次間穩定性強 |
| 胰蛋白胨 | 動物胰酶水解 | 高要求微生物（如支原體、衣原體） | 富含支鏈氨基酸，促進細胞膜合成 |
| 指標 | 標準值 | 檢測方法 |
|---|---|---|
| 總氮含量 | ≥12.0% | 凱氏定氮法 |
| 氨基酸含量 | ≥8.0% | 高效液相色譜法（HPLC） |
| 灰分 | ≤5.0% | 灼燒法 |
| pH值（1%水溶液） | 6.5-7.5 | 電位滴定法 |
| 溶解性 | 全溶，無沉淀 | 目視觀察 |
培養基配制
按配方比例稱取蛋白胨（如LB培養基：10 g/L蛋白胨），加入蒸餾水攪拌溶解。
調節pH至目標值（如7.0±0.2），121℃高壓滅菌20分鐘。
無菌操作
滅菌后培養基需在超凈臺內分裝，避免二次污染。
固體培養基冷卻至50-55℃時倒平板，防止冷凝水過多。
儲存條件
未開封的蛋白胨需密封保存于干燥陰涼處，避免吸潮結塊。
開封后建議分裝，4℃冷藏保存，有效期6個月。
微生物發酵：作為氮源用于抗生素（如青霉素）、氨基酸（如谷氨酸）的生產。
分子生物學：在LB、SOB等培養基中促進質粒擴增和轉化效率。
食品微生物檢測：用于沙門氏菌、金黃色葡萄球菌的分離培養。
環境科學：研究土壤微生物群落對不同氮源的響應。
微生物生長測試
在LB培養基中接種大腸桿菌（E. coli），37℃培養12小時后，菌落直徑應≥2 mm。
氨基酸譜分析
使用HPLC檢測，必需氨基酸（如亮氨酸、異亮氨酸）占比≥30%。
無菌驗證
按《中國藥典》2020版要求，37℃培養7天，無菌生長。
原料溯源
動物源蛋白胨需確認原料無瘋牛?。˙SE）風險，植物源需避免轉基因成分。
批次一致性
長期實驗建議使用同一供應商的同一批次產品，減少實驗誤差。
替代方案
對高成本實驗，可嘗試酵母提取物（Yeast Extract）部分替代蛋白胨（比例1:1）。
Q：蛋白胨結塊是否影響使用？
A：輕微結塊可微波低火加熱溶解，嚴重結塊需更換新批次。
Q：如何降低培養基泡沫？
A：減少蛋白胨用量至8 g/L，或添加0.1%消泡劑（如聚二甲基硅氧烷）。
Q：蛋白胨與水解酪蛋白（Casein Hydrolysate）的區別？
A：蛋白胨為多肽混合物，水解酪蛋白為更小分子肽，適合不同菌株需求。
推薦品牌：Oxoid、BD Difco、青島海博生物
檢測標準：符合USP、EP、CP藥典要求
技術支持：提供氨基酸譜分析報告及微生物生長驗證數據
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