紫外分光光度法定量測定的依據(jù)是比耳定律，即物質(zhì)在一定濃度的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比。許多有機化合物在紫外區(qū)具有特征的吸收光譜，因此可用紫外分光光度法對有機物質(zhì)進行定性鑒定，結(jié)構(gòu)分析及定量測定.其基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外--可見光照射被分析的有機物質(zhì)，引起分子中價電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜，反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內(nèi)，對于一個特定的波長，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測量光譜可以進行定性分析，而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較，還能進行定量分析。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。

 

　　賽默飛紫外分光光度計的檢測過程：

　　光線穿過樣品后，檢測器用于將光線轉(zhuǎn)換為可讀的電子信號。通常，探測器基于光電涂層或半導(dǎo)體。

 

　　光電涂層在暴露于光噴出帶負電荷的電子。當(dāng)電子被射出時，會產(chǎn)生與光強成正比的電流。光電倍增管(PMT)是紫外-可見光譜中較常用的檢測器之一。PMT基于光電效應(yīng)，在曝光時首先發(fā)射電子，隨后發(fā)射的電子依次倍增以產(chǎn)生更大的電流。PMT檢測器對于檢測非常低的光強度特別有用。

 

　　當(dāng)半導(dǎo)體暴露在光下時，可以通過與光強成正比的電流。更具體地說，光電二極管和電荷耦合器件(CCD)是兩種常見的基于半導(dǎo)體技術(shù)的檢測器。

 

　　使用任何探測器產(chǎn)生電流后，信號就會被識別并輸出到計算機或屏幕上。