激光共聚焦熒光顯微鏡活體熒光物質檢查

時間：2023/8/10閱讀：1150

激光共聚焦熒光顯微鏡活體熒光物質檢查

激光共聚焦顯微鏡，簡稱CLSM（Confocal Laser Scanning Microscopy），是一種利用激光共振效應進行成像的顯微鏡。它通過使用激光束掃描樣品的不同層面，將所得到的圖像合成成一幅清晰的三維圖像。與傳統顯微鏡相比，激光共聚焦顯微鏡具有更高的分辨率和更強的穿透能力，可以觀察到更加細微的結構和更深層次的物質。

在活體熒光物質的檢查中，激光共聚焦顯微鏡發揮了重要的作用。通過標記活體細胞或組織的特定結構或分子，激光共聚焦顯微鏡可以實時觀察到這些結構或分子的活動和分布情況。

在生物醫學領域，它可以用于觀察細胞的生長、分裂和死亡過程，研究細胞信號傳導和分子交互作用等。在藥物研發中，它可以用于觀察藥物在活體細胞或組織中的分布情況，評估藥物的療效和毒性。此外，在神經科學領域，激光共聚焦顯微鏡可以用于觀察神經元的活動和連接，揭示大腦的工作機制。

激光共聚焦顯微鏡NCF950(2023)1

NCF950激光共聚焦顯微鏡較寬場熒光顯微鏡的優點：

l 能夠通過熒光標本連續生產薄（0.5至1.5微米）的光學切片，厚度范圍可達50微米或更大。（主要優點）

l 控制景深的能力。

l能夠從樣品中分離和收集焦平面，從而消除熒光樣品通常看到的焦外“霧霾"，非共焦熒光顯微鏡下無法檢測到。（最重要的特點）

l 從厚試樣收集連續光學切片的能力。

l 通過三維物體收集一系列圖像，用于二維或三維重建。

l收集雙重和三重標簽，精確的共定位。

l 用于對在不透明的圖案化基底上生長的熒光標記細胞之間的相互作用進行成像。

l 有能力補償自發熒光。

耐可視共聚焦與尼康共聚焦成效效果圖對比

耐可視共聚焦成像效果圖尼康共聚焦成成像效果圖

NCF950激光共聚焦顯微鏡應用，共聚焦顯微鏡在以下研究領域中應用較為廣泛：

1、細胞生物學：細胞結構、細胞骨架、細胞膜結構、流動性、受體、細胞器結構和分布變化、細胞凋亡；

2、生物化學：酶、核酸、FISH、受體分析

3、藥理學：藥物對細胞的作用及其動力學；

4、生理學：膜受體、離子通道、離子含量、分布、動態；

5、遺傳學和組胚學：細胞生長、分化、成熟變化、細胞的三維結構、染色體分析、基因表達、基因診斷；

6、神經生物學：神經細胞結構、神經遞質的成分、運輸和傳遞；

7、微生物學和寄生蟲學：細菌、寄生蟲形態結構；

8、病理學及病理學臨床應用：活檢標本的快速診斷、腫瘤診斷、自身免疫性疾病的診斷；

9、生物學、免疫學、環境醫學和營養學。

NCF950激光共聚焦顯微鏡配置

NCF950激光共聚焦配置表
激光器	激光405 nm、488 nm、561 nm、640 nm
探測器	波長：400-750nm，探測器：3個獨立的熒光檢測通道；1個DIC透射光檢測通道
掃描頭	最大像素大小：4096 x 4096 掃描速度：2 fps（512 x 512像素，雙向），18 fps（512 x 32像素，雙向），圖像旋轉: 360°
掃描模式	X-T, Y-T, X-Y, X-Y-Z, X-Y-Z-T
針孔	無級變速六邊形電動針孔；調節范圍：0-1.5毫米
共焦視場	φ18mm內接正方形
圖像位深	12bits
配套顯微鏡	NIB950全電動倒置顯微鏡
光學系統	NIS60無限遠光學系統（F200)
目鏡(視野)	10×(25)，EP17.5mm，視度可調-5～+5，接口Φ30
觀察鏡筒	鉸鏈式三目觀察鏡筒，45度傾斜，瞳距47-78mm，目鏡接口Φ30，固定視度；1）目/攝切換：（100/0,50/50,0/100)；2）目視/關閉目視/可調焦勃氏鏡
NIS60物鏡	10×復消色差物鏡，NA=0.45 WD=4.0 蓋玻片=0.17
	20×復消色差物鏡，NA=0.75 WD=1.1 蓋玻片=0.17
	60×半復消色差物鏡，NA=1.40 WD=0.14 蓋玻片=0.17 油鏡
	100×復消色差物鏡，NA=1.45 WD=0.13 蓋玻片=0.17 油鏡
物鏡轉換器	電動六孔轉換器（擴展插槽），M25×0.75
聚光鏡	6孔位電動控制：NA0.55，WD26；相襯(10/20,40,60選配）
聚光鏡	DIC（10X，20X/40X）選配.空孔
照明系統	透射柯拉照明，10W LED照明；
照明系統	落射照明：寬場光纖照明 6孔位電動熒光轉盤（B，G，U標配）；電動熒光光閘；
中間倍率切換	手動1X，1.5X、共焦切換
機身端口	分光比：
機身端口	左側:目視=100：0；右側:目視=100：0；
平臺	電動控制：行程范圍130 mm x100 mm （臺面325 mm x 144 mm ）最大速度：25mm/s；分辨率：0.1μm - 重復精度：3μm。機械可調樣品夾板
調焦系統	同軸粗微動升降機構，行程：焦點上7下2；粗調2mm/圈，微調0.002mm/圈；可手動和電動控制，電動控制時，最小步進0.01um；
DIC插板	10X，20X，40X插板；可放置于轉換器插槽；選配
控制	搖桿，控制盒，USB連接線
軟件	軟件：NOMIS Advanced C 圖像顯示/圖像處理/分析 2D/3D/4D圖像分析，經時變化分析，三維圖像獲得及正交顯示，圖像拼接，多通道彩色共聚焦圖像

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