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            小鼠17-α甲睪酮(17-αMT)檢測試劑盒樣品收集和注意事項

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            小鼠17-α甲睪酮(17-αMT)檢測試劑盒樣品收集:

            1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。
            2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。
            3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
            4. 細胞培養(yǎng)上清:取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
            5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測
            6. 樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。
            7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測),或-80℃(6個月內(nèi)檢測),避免反復凍融。
            8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品zui高值,請根據(jù)實際情況,做適當倍數(shù)稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數(shù))。

            小鼠17-α甲睪酮(17-αMT)檢測試劑盒注意事項:

            (1).實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
            (2).試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
            (3).使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。(4).不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
            (5).洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
            (6).使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
            (7).加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
            (8).按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
            (9).底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

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