本期摘要：PE JANUS G3高通量小規模蛋白純化工作站是作為直觀、靈活和自動化的設備開發的，能夠執行并行蛋白樣本純化。除了在抗體藥領域應用廣泛，近來也在逐步助力AAV以及mRNA的純化應用。

從藥物篩選，成藥性分析，結構優化，藥理毒理研究直至細胞株構建，上下游工藝開發等環節——海量的蛋白樣品撲面而來，做不完的純化實驗，長夜漫漫等待下一個樣品純化，單個樣品動輒3-4個小時的時間消耗……可謂是苦“蛋白純化實驗”久矣。

高通量蛋白純化工作站為加速生物治療分子的發展提供了機會。純化條件的小型化縮短了時間，允許樣品批量平行處理，提供了更高的統計顯著性和更大的變量寬度。

PerkinElmer JANUS G3 BioTx 蛋白純化工作站采用模塊化配置，同一平臺達成四種模式小規模蛋白純化的自動化：

• PhyNexus PhyTips® 帶填料吸頭

• GE PreDictor™ / Pall AcroPrep™ 過濾板

• Atoll RoboColumns® 層析柱

• 重力流柱，兼容脫鹽、蛋白換液

模塊之間任意搭配或組合，只需一臺儀器即可對各種體積和濃度的樣品的快速處理，為上下游流程中“質量源于設計”實驗提供高質量的蛋白樣品。
 

JANUS G3 BioTx 蛋白純化工作站

JANUS G3 BioTx Pro Plus蛋白純化工作站兼容層析柱、帶填料吸頭

匠心獨運的設計理念，備受歡迎的技術呈現，和JANUS G3始終從客戶應用出發的視角是分不開的。

靈活處理蛋白樣品

純化樣品量比較多時：

Varispan 8通道移液臂以及配套多功能移液針單次可平行獨立處理8個樣品,可根據程序設計依次處理不同column組別；移動間距范圍寬廣兼容不同柱型、收集板以及試劑槽類型；試劑槽可根據要求選擇或定制，如消耗量比較多的柱平衡，洗滌和CIP溶液，提供的試劑槽能滿足數升的試劑容量。
 

Varispan 8 通道移液臂以及配套多功能移液針

用于樹脂篩選和方法開發的預包裝色譜柱

MDT模塊化分液技術，可實時自動化切換不同規格的96和384通道移液頭，一次實現96/384通道的樣品抽濾或者PhyTips帶填料吸頭純化，大大提高純化效率。配合抓扳手的使用，可實現整個抽濾環節的全自動處理，無需人工干預。
 

MDT分液技術實現96/384通道樣品抽濾 AcroPrep 96孔過濾板

AcroPrep 96孔過濾板

樣品體積比較大時

四通閥液體置換注射計量泵賦予移液吸頭單次可大體積5mL吸液的能力,減少多次重復吸液的次數，縮短實驗時間；同時為了得到更大回收率的蛋白樣品，可限度降低液體流加速度，提高保留時間。

除此之外，當進行完大體積移液需要更換樣品時，鋼針連同注射泵內外可自動完成內外清洗，避免交叉污染的產生。
 

四通閥注射計量泵原理示意圖

液相驅動，高精度移液

蛋白樣品純化時

需要使用到數種不同組分的液體，如柱平衡液、不同鹽濃度不同pH的雜蛋白洗脫液，*適的洗脫液以及柱再生液體。3板位滑動式傳送帶，可快速帶走廢液，還可定制廢液收集板，廢液體積比較大時，瞬時快速帶走。
 

滑動式傳送帶plate shuttle

純化過程的控制

1、AccuSense液面感應技術，自動液面探測和追蹤：層析柱重力柱內液面，試劑槽液體位置，確保清洗液充分清洗鋼針。
 

固定鋼針或者吸頭可探測或追蹤液面位置

2、當需要對蛋白樣品進行含量，純度，分子量檢測以及表征分析時，需要進行比較的歸一化處理，JANUS支持諸多分析檢測設備如nanodrop數據的直接導入，自動計算稀釋體積。同時在位選擇吸頭，以1uL的移液精度，<3.4%的穩定性滿足小體積移液的高精度要求。

鋼針吸頭同時選擇，沒有任何需要人工介入的更換操作步驟；小體積移液，大體積移液快速，PerkinElmer JANUS G3 高通量小規模蛋白純化工作站與眾不同。
 

微量體積移液時，在不同移液體積下，CV值波動極小，重復性佳

大體積移液時，性均大于99%，CV波動性更小

3、移動的液體收集板位,除了XY走向的移動，Z軸同樣可精細化調節。PerkinElmer*的Assay Plate設計，使得收集板和柱子底端的間距可縮短至0.5mm,以便每個樣品單獨進入各自收集孔中。而標準的Atoll RoboColumn間距至少3mm,過大的間距，液滴滴落時噴濺，會造成樣品間交叉污染。
 

整個流程自動化控制

利用計算機通過WinPREP操作軟件進行編程控制整個純化實驗過程，盡量減少人工干預，自動化實現預定的實驗操作。編程過程簡潔明了，可操作性強。

基本流程如下：

1、根據實驗目的和要求，選定收集完成操作所需的實驗器材和試劑。

2、從WinPREP操作軟件實驗器具庫中選擇相應的實驗器具，拖拉放置到工作臺面上。

3、按需實現的實驗操作選擇相應的移液模板，進行編輯。

4、拖放連線實驗器具，使之與對應的操作步驟中各個操作流程匹配。

5、在實物儀器工作臺面上，組裝放置相應的實驗器材和試劑，核對實物放置的板位和操作軟件程序中設定的板位，確保無確保無誤后，軟件運行按鈕，即可自動化實現預定的純化實驗過程。
 

根據通量和容量需求選擇 PerkinElmer JANUS G3 BioTx Pro或PerkinElmer JANUS G3 BioTx Pro Plus。
 

PE JANUS G3高通量小規模蛋白純化工作站是作為直觀、靈活和自動化的設備開發的，能夠執行并行蛋白樣本純化。除了在抗體藥領域應用廣泛，近來也在逐步助力AAV以及mRNA的純化應用。

后期將為大家帶來PE JANUS G3與AKTA Explorer的平行比較，敬請期待！