作為均相分析技術，TR-FRET技術已經成為藥物研發領域重要的檢測手段。本文將從TR-FRET的原理、特點及HTRF技術優勢和應用領域做一個簡單的介紹。

TR-FRET 介紹

TR-FRET是TRF（Time-Resolved Fluorescence，時間分辨熒光）和FRET（Fluorescence Resonance Energy Transfer，熒光共振能量轉移）技術的綜合。

TRF技術是利用鑭系元素的熒光發射時間長的特性，通過延遲檢測的方式降低背景噪音的檢測方法。

HTRF 延遲檢測原理

FRET技術是當供體熒光分子的發射光譜和受體熒光分子的激發光譜重疊的時候，可以將供體分子的能量共振轉移到受體分子上的技術。

與其它免疫檢測技術（以ELISA為代表）相比較，TR-FRET的特點：

免洗，操作簡便

數據穩定性好

數據背景值低

易于自動化操作

目前市場上，HTRF和LANCE Ultra等技術都屬于生命科學領域比較成熟的TR-FRET技術，HTRF以其出色的穩定性更是贏得了廣泛的應用。

HTRF介紹及其特點

HTRF（Homogeneous Time-Resolved Fluorescence，均相時間分辨熒光）是法國Cisbio公司（已被美國PerkinElmer公司收購，試劑業務現更名為Revvity）于1990年代研發的基于免疫熒光檢測的技術。Cisbio公司已經獲得HTRF的商標。

Cisbio公司

與市場上其它TR-FRET相比，HTRF技術及其產品擁有產品優勢：

1

技術特點

首先，在HTRF技術的供體設計中，科研人員將鑭系元素鎖定在的穴狀化合物（Cryptate）內。該穴狀化合物結構非常穩定，對溫度、光線、pH值、二價金屬離子等均不敏感，避免了環境因素對供體鑭系元素穩定性的影響。

其次，HTRF技術根據蛋白結構及相互作用的特點，提供兩種Donor（Eu和Tb）和兩種Acceptor（XL665和d2），選用優化的供體和受體組合，使得FRET中能量轉移更加有效。

Donor 穩定性比較（HTRF vs 其他TR-FRET）

想了解HTRF技術的穩定性，可以參考：

解密HTRF的高穩定性

2

研發實力雄厚

從1990年代開始，Cisbio公司就專注于HTRF技術的開發和研究，選用HTRF的抗體和供體、受體分子，并根據客戶的實驗反饋，及時對試劑盒和工具系列進行不斷優化和升級，使HTRF產品系列更加穩定可靠。

3

產品系列豐富

HTRF系列產品覆蓋了大部分的藥物發現領域，從早期的GPCR領域研究和激酶研究到生物標記物檢測、細胞因子檢測、信號通路檢測、Toolbox工具系列以及Tag-Lite系列檢測。

各領域的檢測方案（簡介見后文）

4

技術支持專業

HTRF技術2009年進入中國以來，已經成為藥物發現領域重要的檢測手段，為中國創新藥物的發展提供了解決方案。公司除了對HTRF技術的各個應用領域提供詳盡的操作指南之外，還會定期發布新產品，支持最新的藥物研發需求，并有專業的技術團隊對客戶實驗中遇到的問題進行解答和答疑。

北京徑元是Revvity公司的試劑授權經銷商。我們熟悉HTRF技術及其應用領域，并舉辦了多場關于HTRF技術的學術講座，同時，我們與國內研發企業和科研單位保持著密切的交流和溝通。

HTRF技術應用領域簡介

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GPCR研究的完整解決方案

HTRF技術提供cAMP（Gs、Gi）、IP-One（Gq）、GTP-binding、受體配體結合（Tag-Lite）、β-arrestin、胞內信號分子等完整的檢測方案。

詳情請見：

GPCR檢測的完整解決方案

2激酶篩選研究

HTRF技術提供TK和STK激酶的檢測試劑盒，并對277種激酶提供明確的檢測方案和實驗優化條件。

詳情請見：

基于HTRF技術的激酶檢測方法

3Toolbox工具

HTRF技術提供多種標簽抗體，用于蛋白互作和藥物研發階段中自行設計藥物篩選方案。

HTRF PPI Toolbox 產品列表

如果需要進行HTRF技術的PPI實驗設計，可以參考以下文章：

HTRF PPI 實驗條件的優化

HTRF技術PPI實驗案例分享 多樣性

HTRF技術PPI實驗案例分享 分子大小篇

HTRF技術PPI實驗案例分享 親和力篇

也可以咨詢北京徑元來協助構建PPI的實驗設計。

4細胞因子檢測

HTRF細胞因子檢測試劑盒覆蓋主流的因子，詳情可以參考來查詢。

細胞因子檢測方法操作簡單，更適于高通量檢測。

HTRF 細胞因子檢測基本操作流程

如果您對HTRF技術的細胞因子檢測感興趣，可以參考以下小文章：

細胞因子檢測 - HTRF&AlphaLisa技術

HTRF技術檢測新鮮血液樣品中的細胞因子

不同亞型免疫細胞參與免疫進程的HTRF解決方案

5信號通路檢測

HTRF信號通路檢測試劑盒覆蓋大部分的信號通路分子，詳情可以參考查詢。

信號通路檢測分為兩步，細胞處理和信號檢測。一般情況，2個小時就可以完成量化穩定的信號分子檢測，而且比WB更簡便、更省時。

HTRF 信號分子檢測基本操作流程