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            哺乳動物瞬時表達之瞬時轉染與穩定轉染

            2020-10-27  閱讀(704)

            分享:
              哺乳動物瞬時表達是生物哺乳動物系統表達蛋白的方式之一。它能夠在短期內得到一定量的重組蛋白/重組抗體。哺乳動物瞬時表達廣泛地應用于基因產物的快速表達及蛋白質的小規模制備等方面。
             
              將DNA導入真核細胞的方式有兩種:瞬時轉染與穩定轉染。穩定轉染是用于建立克隆的細胞系,這種細胞系中轉染的目的基因整合到染色體DNA中并指導適量目的蛋白的合成。在此我們主要介紹瞬時轉染。
             
              在瞬時轉染中,重組DNA導入感染性強的細胞系以獲得目的基因暫時高水平的表達。轉染的DNA不必整合進宿主染色體,當有大量樣品需要在短時間內分析時,尤其是在轉染后1到4天內收獲細胞,所得溶解產物用于檢測目的基因的表達時,可以采用瞬時轉染的方式。
             
              將基因導入真核細胞的方法有許多種。這些技術可以歸納成3類:生化方法轉染、物理方法轉染,以及病毒介導的轉染。到目前為止,將克隆DNA導人真核培養細胞中,主要采用生化方法。
             
              細胞瞬時轉染表達能夠快速靈活的制備重組蛋白,細胞在轉染后合適時機即能可收獲并進行分析。南京德泰生物主要以CHO(中國倉鼠卵巢細胞)和HEK293(人胚腎細胞)為表達宿主進行懸浮培養,能夠獲得大量的培養上清液,可生產毫克至克級的重組蛋白/重組抗體。目前,瞬時表達技術已廣泛應用于抗體生產,疾病診斷,疫苗開發等多個領域。

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              10多年哺乳動物細胞表達經驗
              多種高效表達載體
              多種蛋白純化方式

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